骨愈1号药物血清对成骨细胞增殖分化功能的影响*
[摘要]目的观察中药骨愈1号药物血清对成骨细胞增殖、分化以及矿化的影响。方法从新生SD大鼠颅骨获取成骨细胞进行培养，取第3代成骨细胞进行试验，将其分为4组，在各组培养液中分别加入不灌胃骨愈1号的新西兰兔血清(对照组)和灌胃骨愈1号浓度分别12.5g/Kg、25g/Kg、50g/Kg的新西兰兔血清(高、中、低剂量组)。用MTT法测定细胞增殖功能；用对硝基苯基磷酸二钠法测定碱性磷酸酶(ALP)活性；用茜素红染色法，在40倍光镜下作矿化结节计数。结果与对照组比较，骨愈1号药物血清高、中、低剂量组在MTT显色的OD值、ALP活性和矿化结节数均明显升高(P200μm为矿化结节的计数标准。在40倍光镜下对各孔作矿化结节计数(矿化结节结数/视野)。
2.5 统计学处理
数据处理运用SPSS for Windows13.0统计软件，各组间比较采用单因素方差分析。
3 结果
, 百拇医药
与对照组比较，骨愈1号药物血清高、中、低剂量组在MTT显色的OD值、ALP活性和矿化结节数均明显升高(P
4 讨论
骨折愈合是一种特殊类型的创伤愈合反应，也是一个极其复杂的生物学修复过程，成骨细胞是骨发生和骨形成的物质基础，对骨组织的损伤修复，促进骨愈合起着关键作用[1]。有研究发现骨折不愈合原因之—可能是骨折端渗出液中成骨细胞生长活力降低所致[2]。因此，如何提高成骨细胞的功能从而加速骨折的愈合，是骨科领域研究的重要课题。
研究发现，成骨细胞可合成和分泌1型胶原与糖蛋白，形成骨基质，并通过ALP等多种酶介导骨组织的矿化过程；成骨细胞还参与骨的吸收、分解，被认为是调控骨吸收的中心细胞，骨的代谢及改建的主要过程是由成骨细胞与破骨细胞的协同作用，在多种细胞因子的调控下，通过复杂分子机制完成的[2]。ALP由成骨细胞产生，富含于胞浆中，其活性的高低既可作为成骨细胞的功能标记物，又可反映成骨细胞分化成熟程度，成骨细胞分泌ALP至细胞外，其分解基质中的磷酸酯，使局部磷酸化，促进羟基磷灰石的形成，并在局部沉积，使基质钙化；同时水解焦磷酸，解除对骨形成的抑制。ALP活性的高表达是成骨细胞分化的早期标志，是最常见的评价骨形成的指标[3 4]。成骨细胞增殖率能反映成骨细胞的数量变化，细胞数量不断增加才能产生丰富的胶原，从而通过钙化基质的形成产生更多的骨组织，促进骨矿化的主要细胞是成骨细胞，矿化是细胞进一步分化成熟的功能表现，矿化结节形成代表了成骨细胞的分化成熟，是成骨功能的形态表现，为骨形成的敏感标志[3 5]。
, http://www.100md.com
骨愈1号方由党参、黄芪、桃仁、丹参、乳香、没药、三七、自然铜、骨碎补、川续断、杜仲、熟地等组成，具有补肾壮骨，活血通络之效。实验结果表明，与对照组比较，骨愈1号方对成骨细胞的增殖与分化均有明显的促进作用，且具有明显的剂量依赖性。表明中药骨愈1号体外能促进成骨细胞的早期增殖与分化，提高矿化功能来促进骨折的愈合。
参考文献
[1] 李楠，王和鸣，林旭，等. 巴戟天对成骨细胞生物学特性影响的实验研究[J].中国医药学报， 2004，19(12)：726～727.
[2] 漆海如，黄永明，刘金文，等. 中医药对成骨细胞作用的研究进展[J]. 中医正骨，2006，18(1)：66～67.
[3] 臧洪敏，陈君长，刘亦恒，等. 葛根素对成骨细胞生物学作用的实验研究.中国中药杂志，2005，30(24)：1947～1949.
[4] 于波，杨久山，刘岩，等. 淫羊藿苷对人成骨细胞的作用. 中医正骨，2006，18(6)：17～18.
[5] 俞索静，肖鲁伟，吴承亮. 右归饮对体外成骨细胞增殖和分化影响的实验研究. 浙江临床医学，2004，6(12)：1027～1029., http://www.100md.com(王秀玲 于文涛)
2.5 统计学处理
数据处理运用SPSS for Windows13.0统计软件，各组间比较采用单因素方差分析。
3 结果
, 百拇医药
与对照组比较，骨愈1号药物血清高、中、低剂量组在MTT显色的OD值、ALP活性和矿化结节数均明显升高(P
4 讨论
骨折愈合是一种特殊类型的创伤愈合反应，也是一个极其复杂的生物学修复过程，成骨细胞是骨发生和骨形成的物质基础，对骨组织的损伤修复，促进骨愈合起着关键作用[1]。有研究发现骨折不愈合原因之—可能是骨折端渗出液中成骨细胞生长活力降低所致[2]。因此，如何提高成骨细胞的功能从而加速骨折的愈合，是骨科领域研究的重要课题。
研究发现，成骨细胞可合成和分泌1型胶原与糖蛋白，形成骨基质，并通过ALP等多种酶介导骨组织的矿化过程；成骨细胞还参与骨的吸收、分解，被认为是调控骨吸收的中心细胞，骨的代谢及改建的主要过程是由成骨细胞与破骨细胞的协同作用，在多种细胞因子的调控下，通过复杂分子机制完成的[2]。ALP由成骨细胞产生，富含于胞浆中，其活性的高低既可作为成骨细胞的功能标记物，又可反映成骨细胞分化成熟程度，成骨细胞分泌ALP至细胞外，其分解基质中的磷酸酯，使局部磷酸化，促进羟基磷灰石的形成，并在局部沉积，使基质钙化；同时水解焦磷酸，解除对骨形成的抑制。ALP活性的高表达是成骨细胞分化的早期标志，是最常见的评价骨形成的指标[3 4]。成骨细胞增殖率能反映成骨细胞的数量变化，细胞数量不断增加才能产生丰富的胶原，从而通过钙化基质的形成产生更多的骨组织，促进骨矿化的主要细胞是成骨细胞，矿化是细胞进一步分化成熟的功能表现，矿化结节形成代表了成骨细胞的分化成熟，是成骨功能的形态表现，为骨形成的敏感标志[3 5]。
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骨愈1号方由党参、黄芪、桃仁、丹参、乳香、没药、三七、自然铜、骨碎补、川续断、杜仲、熟地等组成，具有补肾壮骨，活血通络之效。实验结果表明，与对照组比较，骨愈1号方对成骨细胞的增殖与分化均有明显的促进作用，且具有明显的剂量依赖性。表明中药骨愈1号体外能促进成骨细胞的早期增殖与分化，提高矿化功能来促进骨折的愈合。
参考文献
[1] 李楠，王和鸣，林旭，等. 巴戟天对成骨细胞生物学特性影响的实验研究[J].中国医药学报， 2004，19(12)：726～727.
[2] 漆海如，黄永明，刘金文，等. 中医药对成骨细胞作用的研究进展[J]. 中医正骨，2006，18(1)：66～67.
[3] 臧洪敏，陈君长，刘亦恒，等. 葛根素对成骨细胞生物学作用的实验研究.中国中药杂志，2005，30(24)：1947～1949.
[4] 于波，杨久山，刘岩，等. 淫羊藿苷对人成骨细胞的作用. 中医正骨，2006，18(6)：17～18.
[5] 俞索静，肖鲁伟，吴承亮. 右归饮对体外成骨细胞增殖和分化影响的实验研究. 浙江临床医学，2004，6(12)：1027～1029., http://www.100md.com(王秀玲 于文涛)