任彦喜

    摘要：目的 分析ENA抗体检验和血清体液免疫检验在诊断系统性红斑狼疮(SLE)方面的价值。方法 选择2021年1月至2022年2月东明县人民医院收治30例的SLE患者纳入研究组，同期30例健康者納入对照组，均行ENA抗体检验和血清体液免疫检验，对比两组体液免疫指标、ENA抗体阳性检出率。结果 研究组ds-DNA、Sm、SSB、SSA、nRNP抗体阳性检出率高于对照组(P0.05)。

    1.2 研究方法

    血清体液免疫检验：采集血液，分离血清，使用ELISA法检测IgM、IgG、IgA、C3、C4。(1)包被：用包被液稀释抗体至蛋白含量为0.5～20 ?G/ml，100 ?l/孔，4℃包被过夜。(2)洗盘：PBS冲洗2～3次即可，每次3～5 min;(3)封孔：按200～250 ?l/孔加封孔液，4℃过夜，然后弃孔内封孔液;(4)样品处理：用洗涤液或样品稀释液将样品(包括未知抗原)稀释至所需浓度;(5)标准溶液：用洗涤液或样品稀释液将标准溶液稀释至所需浓度;(6)加样：依次加入50～100 ?l/孔稀释的标准溶液、处理过的样品、阴性对照和阳性对照，室温或37℃孵育30～60 min;(7)加入酶标抗体：按照产品说明书稀释酶标抗体，按50～100 ?l/孔加入新鲜制备的酶标抗体，室温或37℃孵育1 h;(8)加入显色底物溶液：按100～150 ?l/孔加入新配制的TMB底物溶液，室温避光15～30 min。(9)反应终止：每个反应孔加入50 ?l终止液。(10)结果：反应孔颜色越深，阳性程度越强。阴性反应是无色或很淡的。根据颜色的深浅，用“+”和“-”表示。OD值也可以在450 nm(ABTS为410 nm)下测量。空白对照孔置零后 ......