徐文杰陈 颖

    (1.广东省第二中医院

    (广东省中医药工程技术研究院)，广东省中医药研究开发重点实验室广州510095；2.广东食品药品职业学院广州510520)

    基于GC-MS的心肌缺血大鼠血浆中内源性代谢物测定方法的建立△

    徐文杰1陈颖2*

    (1.广东省第二中医院

    (广东省中医药工程技术研究院)，广东省中医药研究开发重点实验室广州510095；2.广东食品药品职业学院广州510520)

    目的：建立GC-MS测定心肌缺血大鼠血浆中内源性代谢物的方法。方法：皮下注射异丙肾上腺素复制大鼠心肌缺血模型，采用DB-5MS Ultra Inert(30m×250μm，0.25μm)色谱柱，GC-MS进行程序升温，氦气(纯度>99.999%)为载气；无分流进样；流速为1mL·min-1；进样口温度设为250℃；进样量为2μL。质谱参数：离子源温度设为230℃；电子能量为70eV；电子倍增器电压1847V；电离方式EI。质谱采用全扫描方式(扫描范围30～550m/z)进行数据采集。自建对照品物质库，并参考气质工作站的数据库对内源性生物标志物进行鉴定指认，然后进行方法学考察，包括精密度、重现性、稳定性。结果：仪器与方法精密度、重复性和稳定性试验的相对峰面积RSD值均小于20%。结论：该方法快速、灵敏、准确、重复性好，可用于心肌缺血大鼠血浆中内源性代谢物的测定，该方法可应用于心肌缺血模型的代谢组学研究。

    大鼠 检测方法 GC-MS 心肌缺血 代谢组学

    近年来，气相色谱/质谱联用技术(GC-MS)具有灵敏度好、费用低、色谱性能较好等优点，已被广泛应用于植物代谢组学、微生物和临床代谢组学研究[1]，加上其庞大化合物谱图库为鉴定工作带来了很大的便利，能提供定量和定性的信息，在代谢组学研究中显示出突出的优势。代谢组学研究的对象主要是动物体液中的代谢物，如血液、尿液中的糖类，氨基酸，脂肪酸，甾体类物质，胺类[2～3]，这些物质的共同特征是极性强、挥发性低，所以往往不能直接进样分析，需进行适当的化学处理将其转化成挥发性衍生物，使其适用于气相色谱进行分离分析，此方法不仅可以扩大气相色谱的测定范围，而且转化成衍生物后，生物样品中结构极其近似的化合物更易被区分，同时还可解决载体、柱壁对高极性、低挥发性样品的吸附问题，改善样品的峰形[4]。

    本文采用气相色谱/质谱联用(GC-MS)技术，复制大鼠心肌缺血模型，建立大鼠血液中内源性代谢物的测定方法，获得每个峰的质谱图，通过每个峰代表的化合物的分子结构碎片峰的类型和m/z ......