张 燃

    (宁夏职业技术学院银川750021)

    与Aβ42结合的噬菌体展示多肽的淘选△

    张燃

    (宁夏职业技术学院银川750021)

    阿兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)，即老年痴呆，是一种十分常见的神经系统退行性疾病，β-淀粉样蛋白(Aβ)在细胞外异常聚集、沉积是其致病机制之一。目的：筛选与Aβ42集合的噬菌体多肽。方法：本实验以Aβ42寡聚体为靶蛋白，对随机环形噬菌体七肽库进行筛选，对于筛选的结果用酶联免疫吸附试验进行验证。结果：得到200株噬菌体克隆，全部为阳性并且部分与Aβ42的结合力极强。结论：通过对随机环形噬菌体七肽库筛选可得到与靶蛋白(Aβ42)结合的噬菌体阳性克隆，理论上这些阳性噬菌体所展示的多肽可以作为配体与Aβ42(受体)结合，而这种结合则有可能影响Aβ42寡聚体的聚集和沉淀，从而为阿兹海默症的治疗提供某些支持。

    阿兹海默症 β-淀粉样蛋白 生物淘选

    阿兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)，即老年痴呆，是一种十分常见的神经系统退行性疾病[1]。AD主要有三大病理特征[2，3]，分别为老年斑(Senile plaque，SP)，神经元纤维缠结(Neurofibrillary tangles，NFT)以及由退行性突触病变和神经元死亡造成的广泛性脑萎缩。其中老年斑主要分布于大脑皮质和基底神经节等处，其斑块主要是由β淀粉样蛋白(β-amyloid，Aβ)在细胞外异常聚集、沉积而形成的。目前，AD的病因和致病机制仍然没有被完全阐明，主要有Aβ学说、TAU蛋白异常磷酸化学说、神经凋亡学说等，其中Aβ学说逐渐占据主流地位。

    1 材料

    1.1环形七肽库及所用菌株：Ph.D.-C7CTM环肽库购自New England Biolabs、大肠杆菌ER2738。

    1.2主要试剂及仪器

    1.2.1主要试剂及培养基：噬菌体表面衣壳蛋白Ⅲ展示随机环形七肽库(Ph.D.-C7C Phage Peptide Library)试剂盒、异丙基-β-D硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside，IPTG)、聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)-8000、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopy ......