林晓萍(福建医科大学附属第二医院呼吸内科泉州362000)

    乙酰半胱氨酸抑制脂多糖诱导的人肺N C I-H 292细胞粘蛋白M U C 5AC表达△

    林晓萍(福建医科大学附属第二医院呼吸内科泉州362000)

    目的：研究乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导的气道粘蛋白MUC5AC表达的调控作用并探讨可能的机制。方法：体外培养人气道上皮细胞NCI-H292，实验分为对照组、黏液高表达组(LPS组)及乙酰半胱氨酸干预组(NAC+LPS组)，分别采用Real time PCR和Western blot方法检测NCI-H292细胞MUC5AC、Nrf2的mRNA含量及蛋白表达水平。结果：LPS刺激NCI-H292细胞表达MUC5AC，MUC5AC mRNA及蛋白表达分别增加7.169±1.785及1.473±0.098(P均1 材料与方法

    1.1主要材料：人气道上皮细胞NCI-H292株(购自中国科学院上海细胞库)，RPMI-1640培养基及胎牛血清(购自Gibco)；N-乙酰半胱氨酸(购自sigma公司)，RIPA细胞裂解液及BCA蛋白定量试剂盒(购自上海碧云天生物有限公司)，Trizol(购自Invitrogen公司)，逆转录试剂盒和Real time PCR试剂盒(均购自TARAKA公司)，Real time PCR引物(由上海生工生物工程技术服务公司合成)，鼠抗人MUC5AC单克隆抗体(购自Thermo公司)，兔抗人Nrf2单克隆抗体(购自abcam公司)，其余试剂均为国产分析纯。

    1.2主要方法

    1.2.1细胞培养：人气道上皮细胞NCI-H292使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养，每2～3d更换一次培养液，每4～5d以1∶3比例传代一次。

    1.2.2实验分组：取对数生长期的NCI-H292细胞接种于6孔培养板，细胞总数5.0×105个/2mL，置于37℃、5%CO2培养箱中培养 ......