番石榴叶中总黄酮的提取及其抗氧化活性研究
叶总,光度,1材料与试剂,2方法与结果,1番石榴叶总黄酮的含量测定,2改进番石榴叶的总黄酮提取工艺,3番石榴叶总黄酮体外抗氧化活性研究,3讨论
李丙添,宋凤兰,刘锐锋,廖础欣,赵伟国(1.中山市人民医院药学部,广东 中山 528403;2.广东药科大学中山校区,广东 中山 528400)
对于桃金娘科番石榴树植物中的番石榴,其干燥叶以及带叶嫩枝就是番石榴叶,在我们华南地区多有种植,资源丰富[1]。在中医领域中,认为番石榴味涩以及性平,具有清热解毒、燥湿健脾的功效。而通过现代医学的实验发现,番石榴的抗病毒、抗疟、止泻、降血糖血脂等药理作业非常显著[2-4]。番石榴叶中的黄酮、酚类、多糖、皂苷、挥发油等功能成分含量较大,特别是黄酮类化合物和其抗菌消炎、降血糖、降血脂、抗病毒等方面有着直接关系,具有很高的研究价值[5-6]。本课题采用超声法提取番石榴叶中的总黄酮,采用正交实验方式对番石榴叶总黄酮的提取工艺展开优化,并对提得总黄酮的抗氧化活性进行考察,为其后续深入开发以及应用提供理论保障。
1 材料与试剂
红心番石榴叶采自广东省湛江市,经鉴定为桃金娘科番石榴属番石榴叶;采用天津市大茂化学试剂厂的三氨基甲烷、焦性没食子酸、硝酸铝;采用上海伊卡生物技术有限公司的DPPH、ABTS;采用天津市永大化学试剂有限公司的硫酸亚铁、水杨酸、30%双氧水、过硫酸钾、盐酸;其他实际都选择分析纯。
选择昆山市超声仪器有限公司的KQ-100VDE三频数控超声波清洗器;选择上海美谱达仪器有限公司的V-1100型可见分光光度计;选择温岭市林大机械有限公司的摇摆式高速万能粉碎机;选择上海博迅实业有限公司GZX-9240MBE数显鼓风干燥箱。
2 方法与结果
2.1 番石榴叶总黄酮的含量测定
参考有关文献,采用Al(NO3)3直接显色法测定番石榴叶总黄酮含量[7]。移取芦丁标准溶液或待测样品液1mL于25mL容量瓶中,添加1mL的10%Al(NO3)3溶液,混匀,之后静止放置6分钟,采用70%乙醇进行定容处理,保证满足刻度要求,之后摇匀并静止放置10分钟,在413纳米位置开展吸光度的测试工作。芦丁标准溶液在0.0128~0.0896mg/mL的范围内,吸光度与浓度的线性方程为Y=19.852X+0.1224,r=0.9996,线性关系良好。
2.2 改进番石榴叶的总黄酮提取工艺
番石榴叶40℃干燥至恒重,粉碎过40目筛,得番石榴叶粉末备用。经预实验筛选,选择超声法提取番石榴叶中总黄酮 ......
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