纪梅芳,许惠春

    (厦门大学附属第一医院，福建 厦门 361000)

    原发性肝癌在临床被诊断时多数患者处于中晚期,失去手术治疗的机会[1]。因此,发现对人体正常组织损伤小的有效药物已成为肝癌治疗的关键。细胞自噬是在能量贫乏、外界刺激等压力下,为了维持细胞的稳态,机体通过降解细胞内变性、损伤、衰老的细胞器回收利用营养物质,实现细胞自身代谢需要和细胞器的更新。细胞自噬一方面促进细胞死亡,另一方面能够促进细胞的存活。大多数文献认为自噬可抑制肿瘤的形成[2-3]。在肿瘤早期,自噬能限制肿瘤中的坏死与炎症,从而间接抑制肿瘤细胞的转移。因此,对于细胞自噬的相关研究,有助于深入了解肿瘤的发病机制,指导临床诊疗。柴胡皂苷是中药柴胡的主要成分,其成分中药理活性最大的即柴胡皂苷D(SSD)[4]。其可以调节免疫因子,对于抗炎、抗病毒、护肝等均有显著作用,毒副作用小[5-6]。本文目的在探讨柴胡皂甙D(SSD)对人肝癌细胞自噬水平的影响,为肝癌治疗提供借鉴。

    1 材料和方法

    1.1 研究材料

    人肝癌细胞系PLC、MHCC-97H、SMMC-7721以及Huh7均购自美国模式培养物集存库(ATCC)。

    1.2 实验方法

    1.2.1 实验分组

    所有细胞分三组,对照组、SSD组、SSD+自噬抑制剂3-MA组。对照组不做任何处理。SSD组的细胞采用20 mM的SSD处理48小时。SSD+自噬抑制剂3-MA组的细胞同时采用20 mM的SSD和10 mM 的3-MA处理48小时。

    1.2.2 MTT法检测SSD对于肝癌细胞体外增殖的影响

    将对数生长期的人肝癌细胞系PLC、MHCC-97H、SMMC-7721和Huh7常规消化、离心并重新悬浮以制备单细胞悬浮液 ......