王国英,王瑞生,朱树国,王 勤,莫日根,周 刚*,朱叶青*

    (1.内蒙古自治区药品检验研究院,内蒙古 呼和浩特 010020; 2.呼和浩特市检验检测中心,内蒙古 呼和浩特 010020; 3.呼和浩特市农牧技术推广中心,内蒙古 呼和浩特 010020)

    酪蛋白胨是以酪蛋白(从牛奶中提取,又称干酪素、酪朊、乳酪素)作为原材料,经胰蛋白酶消化水解、中和、过滤、浓缩精制而成的粉末。酪蛋白胨与一般蛋白胨相比水解程度更高、胨分子量分布更加均衡,国际上普遍将酪蛋白胨用作培养基的氮源[1]。然而国内外普遍存在培养基质量差异和批间质量不稳定的问题[2-4],酪蛋白胨作为培养基的主要原材料,其质量已经成为培养基生产企业提升产品质量的瓶颈[5]。在我国培养基质量标准体系建设较为落后[6],对培养基原料的系统研究较少[7],对酪蛋白胨的检测指标主要有pH值、澄明度、含水量、炽灼残渣、含氮量等[8]。为了提升我国培养基的总体质量,缩小与国际知名品牌培养基的差距,我们通过对酪蛋白胨中氨基酸进行定量,来有效的控制培养基原材料的质量。

    目前,氨基酸的测定方法很多,有气相色谱法[9]、液相色谱法[10]、离子色谱法[11]、气相色谱-串联质谱法[12]、液相色谱-串联质谱法[13]、同位素质谱法[14]等。氨基酸自动分析仪法是最常用的一种分析方法[15-17],它是以阳离子交换树脂为固定相,酸性缓冲液为流动相,在柱后采用茚三酮溶液与氨基酸衍生生成具有可见光吸收的衍生物进行检测,具有重复性好、仪器稳定、结果可靠等优点[18]。本文通过对酪蛋白胨的水解条件参数进行优化,建立了氨基酸分析仪测定酪蛋白胨中17种氨基酸的方法,该方法准确、灵敏,填补了我国培养基原材料酪蛋白胨中氨基酸数据的空白,为研制纯化学培养基以及提升我国培养基质控水平提供数据支撑 ......