张玉穗,刘 嵘,丁 远

    (贵州中医药大学第一附属医院放射科,贵州 贵阳 550000)

    半枝莲为唇形科植物半枝莲的干燥全草,具清热解毒、散癖止血、利尿消肿之功效,近些年的研究发现其具有很好的抗肿瘤活性[1-3],已经成为国内外抗肿瘤中药研究的热点[4-5]。研究发现半枝莲的主要生物活性成分半枝莲多糖(Scutellaria barbata polysaccharides,SBPS)可以提升小鼠溶血素水平[6]并抑制小鼠体内肿瘤的生长[7]。肿瘤生长的过程需要汲取营养物质,故随着肿瘤体积的增大,肿瘤周边基质会形成新生血管[8],这种新生血管是肿瘤发生远处转移的重要通道[9-10]。因此,抑制血管生成一直都是对抗肿瘤的重要研究方向。血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在肿瘤血管的发生和生长过程中具有极为重要的作用,血清VEGF的水平可以对肿瘤预后做出评估[11-12]。本研究基于大鼠肝癌细胞模型,以VEGF为指标观察半枝莲多糖对肿瘤组织中血管生成的影响,并对其作用机制进行初步探讨。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物和瘤株

    研究选取4～6周龄Nu/Nu裸鼠24只,体重200g左右,购自江苏集萃药康生物科技股份有限公司。肝癌HepG2瘤株购自于中国医学科学院肿瘤研究所。

    1.2 实验材料和试剂

    半枝莲多糖为中药半枝莲饮片通过水煮醇沉方式获得的提取物,由本实验室提供,药材购买于购自宁波德康生物制品有限公司;反转录试剂盒购自GeneStar公司;注射用氨基甲酸购自上海儒吉生物科技发展有限公司;泛影葡胺购自上海旭东海普药业;高糖细胞培养液(DMEM)购自Gibco公司;庆大霉素购自西南药业股份有限公司;CD34购自Abcam公司;VEGF单克隆抗体购自Abcam公司(货号:ab68334);中杉金桥二步法免疫组化检测试剂盒(货号:K116812c);DAB显色试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司 ......