文/薛达冰

    目前，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RTPCR)已经广泛应用于临床RNA病毒核酸定性检测。FQ-RTPCR具有许多优势：(1)FQ-RTPCR在封闭的8联管中进行，无须进行后处理，产物污染少，假阳性发生率比较低；(2)能够实现自动化，结果简单明了；(3)工作效率高，可以实现样本高通量检测；(4)灵敏度高、特异性强，能快速、准确完成核酸样本检测。但是，在近期的临床实践中发现，核酸检测结果会出现与临床诊断不符，出现假阳性或假阴性的现象，检测结果有时会受到质疑。因此，核酸检测的质量控制是当下临床检验工作者重点关注的问题。为此，本文将从以下三个方面阐述利用FQ-RTPCR定性检测RNA病毒核酸的质量控制要素，为提高核酸检测结果准确性提供保障。

    1 分析前的质量控制

    1.1 样本运输与保存

    在自然条件下存在着大量的RNA酶。有研究表明，RNA病毒的核酸在室温条件下极易降解。因此，在RNA病毒样本采集后，应立即将样本置于的RNA病毒核酸专用保存液中，并尽快安排送检，并用冰袋保持样本处于低温状态。如果采集后的样本不能及时送检，则应将样本存放于4℃中保存。标本送到实验室后，实验室工作人员尽快安排检测，如果样本能在24h内检测，则可置于4℃保存；若样本在24小时内无法将样本检测完毕，则应将样本放于-70℃冰箱保存。

    1.2 实验室设施

    在PCR实验室，用于进行实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应的仪器主要有实时荧光定量PCR仪、全自动核酸提取仪、生物安全柜、冰箱、移液器、小型低速离心机等 ......