D-氨基葡糖盐酸盐体内外抗肿瘤作用实验研究
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摘要：目的研究D-氨基葡糖盐酸盐(GAH)的抗肿瘤作用。方法用SRB法观察GAH的体外抗肿瘤作用，通过GAH对S180，H22荷瘤小鼠瘤重和生存时间的影响，观察 GAH的体内抗肿瘤作用。结果GAH可明显抑制S180小鼠瘤体的生长，明显延长H22荷瘤小鼠的生存时间；对3种人癌细胞(HepG-2，LS-174，BGC-7901)具有一定的杀伤作用，以对HepG-2细胞的抑制作用较为明显。结论GAH于实验条件下在体内外均有一定的抗肿瘤作用。
关键词：D-氨基葡糖盐酸盐；抗肿瘤作用
中图分类号：R979.1文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)02-0008-03
Study on Antitumor Effect of D-Glucosamine Hydrochloride in Vitro and in Vivo
XU Hai-jiao1, CAO Xiu-ming1、2, JI Yu-bin1, LI Hui1
(1.Center of Research and Development on Life Sciences and Environmental Sciences, Harbin University of Commerce, Harbin 150076,China; 2.School of Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003,China)
Abstract：Objective To study the antitumor activity of D-glucosamine hydrochloride(GAH). Methods The antitumor activity in vitro was observed by SRB, and the effect in vivo was studied by observing tumor weight and survival time of S180 and H22 mice. Results GAH was a powerful antitumor agent in 3 kinds of human cancer cell lines(HepG-2、LS-174、BGC-7901), especially HepG-2. GAH also inhibited the growth of cancer cells of S180 mice and prolonged the survival time of H22 mice. Conclusion GAH has a relative high potent antitumor effect both in vitro and in vivo.
Key words：D-glucosamine hydrochloride; antitumor activity
D-氨基葡糖盐酸盐又称葡糖胺盐酸盐(D-glucosamine hydrochloride，GAH)，化学名2-氨基-2-脱氧-D-葡糖盐酸盐，其结构为D-葡糖分子中C2-羟基被氨基取代，因氨基显碱性，与盐酸成盐[1, 2]。目前，GAH抑制癌细胞及肿瘤细胞生长等作用的研究日益受到重视。本研究围绕GAH的体内、外抗肿瘤作用展开，以冀为本品的深入研究及应用提供实验基础。
1材料
1.1肿瘤细胞系和瘤株
人肝癌细胞(HepG-2)、肠癌细胞(LS-174)、胃癌细胞(BGC-7901)、小鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(H22)(哈尔滨医科大学肿瘤防治所提供)。
1.2动物
昆明种小鼠(黑龙江省肿瘤防治研究所提供，体重20±2.0g，雄性。合格证号：黑动字P00101014)。
1.3主要试剂与仪器
GAH(中国海洋大学刘万顺教授惠赠)；小牛血清、RPMI-1640培养液(Gibco)；SRB(Sigma)；5-氟尿嘧啶(5-FU，上海海普制药厂)；环磷酰胺(CTX，江苏恒瑞医药股份有限公司)；LNA-Ⅲ型二氧化碳培养箱(日本)；EL311型酶标仪(美国BIO-TEK公司)。
2方法
2.1体外抗肿瘤作用
SRB法检测GAH体外细胞毒。SRB法为一种细胞毒实验，以检测培养细胞的蛋白质来确定细胞生长和存活情况。本实验通过SRB法检测GAH体外对HEPG-2，BGC-7901，LS-174细胞的抑制作用[3]。
实验所用细胞于含5% CO2的37 ℃培养箱中培养传代，用含10%胎牛血清及100 U/mL青霉素、100 μg/mL链霉素的RMPI 1640培养液培养；用0.25% 胰酶消化传代，每3~4 d换培养基1次，待细胞长满及时传代。
将对数生长期的细胞经0.25% 胰酶消化分散后计数制成细胞悬液，细胞浓度调至1×104个/mL，接种于96孔板 ......
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