积累5-甲基四氢叶酸双抗突变株的选育及条件优化(2)
mL/min,进样量20μL。
1.5 确定积5-MTHF的最佳培养时间与温度
酵母中不同形式叶酸的含量受酵母发酵时间和温度的影响。单因素法确定红酵母的最佳培养时间和温度,使菌体中叶酸主要以5-MTHF的形式存在,HPLC检测5-MTHF产量。
2 结果
2.1 诱变菌种的确定
检测菌株中叶酸含量、存在形式和药物敏感度,产朊假丝酵母叶酸含量较高,但叶酸存在形式复杂;啤酒酵母DOM-4对药物不敏感;解脂假丝酵母敏感度低,叶酸形式复杂;未在热带假丝酵母中检测到叶酸。红酵母RY-17药物敏感度最高,利于双抗突变株的选育,其叶酸主要以THF和5-MTHF存在,叶酸种类简单,有利于5-MTHF的分离。因此本实验以红酵母RY-17作为诱变的出发菌株 ......
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