HIV感染者T淋巴细胞亚群水平分析
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[摘要]目的:检测AIDS患者和HIV感染者外周血T淋巴细胞亚群的表达和绝对计数情况,分析T淋巴细胞亚群水平表达与HIV患者的病程进展情况。方法:应用流式细胞仪三色荧光标记和绝对计数法检测30例正常健康成人,15例AIDS患者和20例HIV感染者的外周血 CD3+、CD4+、CD8+的表达水平。结果:AIDS患者和HIV感染者的CD4+淋巴细胞明显比正常人低,特别是AIDS患者CD4+淋巴细胞数低于200个/mm3,CD8+淋巴细胞显著增高, CD4+/CD8+比值倒置。结论:用FCM检测AIDS患者和H IV感染者的免疫状况可作为评价AIDS病程进展的重要指标。
[关键词]流式细胞仪;艾滋病;T淋巴细胞亚群
[中图分类号]R511 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2007)05(c)-057-01
获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)是由免疫缺陷病毒HIV感染所引起的一种严重的传染性疾病,HIV主要侵犯CD4+T淋巴细胞,并可导致细胞免疫损害。 T淋巴细胞亚群的水平和疾病的进展程度有密切关系,是判断病情进展,推测预后及评价抗病毒疗效的一项重要指标。
1 材料与方法
1.1 病例资料
15例AIDS患者,20例HIV感染者来源于本市疾病控制中心送检和本院就诊的2003~2006年病例,均经免疫印迹试验确诊。30例健康成人标本为本院体检中心送检。根据临床医生分期诊断将感染者分为两组,即HIV感染者无症状组(AS组)、艾滋病组(AIDS组)。
1.2 主要仪器和试剂
BeckmanCoulter Epics XL流式细胞仪; CD4+-FITC/CD8+-PE/CD3+-PECYS三色荧光标记抗体,IgG二色荧光标记抗体。
1.3 研究及统计方法
3组均采空腹静脉血2 ml,EDTA-K2抗凝。取CD4+-F ITC/CD8+-PE/CD3+-PECYS三色荧光标记抗体20 μl和抗凝全血50 μl加入TruCOUNTTube绝对计数专用试管中充分混匀,室温,避光孵育20 min,加入1×FAGS溶血剂450 μl,充分混匀,室温下避光孵育15 min待测。另取一支管加入IgG二色荧光标记抗体20 μl和抗凝血50 μl作为阴性对照。运行SYSTEM Ⅱ程序上机检测,用FLOW CHECK校准FCM的光路和流路。确定其CV值小于2%。每管收集5 000个以上细胞进行分析。
数据以x±s表示,采用t检验,方差分析,判断各组之间的相关程度。
2结果
AS组和AIDS组的CD4+淋巴细胞的绝对数和百分率均明显低于正常组(P
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