高压培养对血管内皮细胞t-PA和PAI-1的影响及卡托普利干预的效果(2)
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[Key words]Vascular endothelial cells;High hydrostatic pressure;Simvastatin;Tissue-type plasminogen activator;Plasminogen activator inhibitor type-1
血栓性疾病是高血压常见的致残和死亡原因,降压治疗能显著降低高血压患者血栓形成的危险,这暗示高血压与血管内抗血栓功能的紊乱有关[1]。由血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)合成并释放的组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator, t-PA)和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)是纤溶系统的关键性的调节物质。研究表明,高血压患者复杂的血流动力学会影响血管内皮细胞的功能,但高血压时显著增高的静水压对VECs分泌t-PA及PAI-1的影响及其作用机制以及卡托普利干预的效果尚未见详细报道。
1 材料与方法
1.1 材料
人脐静脉内皮细胞系(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)由中国医学科学院上海细胞研究所提供。t-PA和PAI-1诊断试剂盒(ELISA法)购自上海太阳生物技术公司。荧光钙探针Fluo-3/AM购自Caibiochem公司。卡托普利针(Captopril,Cap):江苏常州制药厂,批号:990819。贮存浓度为5×10-4 mol/L,使用终浓度为10-5 mol/L。采用Typan Blue染色和细胞记数方法进行细胞毒性试验,验证本研究所用的各药物浓度对细胞生长无显著毒性,细胞存活率达90%以上。
1.2 压力培养方法
高压培养装置由我们研究所自行研制设计,由带有压力表和进气阀的高压锅组成。高压锅置于37℃、5%CO2细胞培养箱中,通过进气阀向高压锅内持续供应气体以调节压力稳定在预定的水平 ......
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