神经胶质瘤细胞对血管新生作用及其血管生成素-2表达的影响(2)
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1.3.1.3正常人神经胶质细胞标本取自动-静脉畸形手术切除正常脑组织，方法与鉴定同上。
1.3.2 肿瘤细胞条件培养液的制备将培养达亚融合状态的神经胶质瘤细胞弃去培养液，加入不含血清的培养液6 h后，收集培养上清与DMEM 培养液分别以1∶2、1∶1、2∶1比例混合作为不同浓度的肿瘤细胞条件培养液。
1.3.3 胶质瘤细胞血管生成素-2的表达用免疫细胞化学法检测培养的正常神经胶质细胞和神经胶质瘤细胞中血管生成素-2的表达。积分光密度(IOD)的测定：每个玻片取5个视野，用图像分析软件分析其光密度。
1.3.4 血管腔样结构形成的检测将Matrigel涂于无菌24孔板的玻片上，内皮细胞制成悬液接种在玻片上，对照组为无血清DMEM培养液，实验组取不同浓度的肿瘤细胞条件培养液(肿瘤细胞上清液与DMEM 培养液之比分别为1∶2、1∶1、2∶1)作用24 h。光镜下观察，内皮细胞连接形成C形即为一个管腔，低倍镜(40×)下取3处管腔密集的视野，在每个放大(100×)的视野计数管腔数。
1.4 统计学方法
实验数据以均数±标准差表示，多组均数间的比较采用F检验。P
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