骨桥蛋白在体外诱导大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化中的作用
实验组,细胞周期,培养的,细胞生长曲线,碱性磷酸酶,活性测定,对照组
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吴沁民 王东 孙海钰 张磊 山西医科大学第二医院;
【摘要】目的:观察骨桥蛋白是否能诱导体外培养的大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化,探讨其在骨折愈合过程中的作用机制,为其以后在骨折愈合方面的研究提供确切的理论依据。方法:以冲洗法获取Wistar大鼠骨髓,用贴壁法分离提纯BMSCs,传至第3代后分组,体外培养的BMSCs分为实验组和对照组,实验组添加含0.2nmol/L骨桥蛋白的DMEM条件培养基;对照组为不含骨桥蛋白的DMEM培养基,于不同时间点收集细胞。通过光镜观察培养的细胞形态,以细胞计数法测定生长曲线,应用流式细胞仪分析细胞周期,并行碱性磷酸酶(ALP)染色和活性测定及骨钙素(OCN)含量测定。结果:实验组细胞具有成骨细胞的形态学特征;实验组细胞生长曲线右移,细胞G0/G1期比例平均增加13.17%(P0.01),S期比例减少74.93%(P0.01);实验组ALP染色呈阳性,且ALP活性、OCN含量均较对照组明显提高。结论:骨桥蛋白对BMSCs有促进成骨分化的作用。
【关键词】 骨桥蛋白 骨髓基质干细胞 成骨细胞分化 实验组 细胞周期 培养的 细胞生长曲线 碱性磷酸酶 活性测定 对照组
【分类号】R329.28
种子细胞、支架材料和调控因子是组织工程学研究的3个主要方面[1-4]。骨髓基质干细胞(BMSCs)是骨组织工程最常用的种子细胞[5-6]。近年来,用BMSCs复合各种生物支架修复骨缺损已经取得了非常大的成就,而如何利用一些诱导因素促进BMSCs向成骨细胞分化已经成为现阶段骨组织工程
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摘要：目的：观察骨桥蛋白是否能诱导体外培养的大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化，探讨其在骨折愈合过程中的作用机制，为其以后在骨折愈合方面的研究提供确切的理论依据。方法：以冲洗法获取Wistar大鼠骨髓，用贴壁法分离提纯BMSCs，传至第3代后分组，体外培养的BMSCs分为实验组和对照组。实验组添加含0.2 nmol/L骨桥蛋白的DMEM条件培养基；对照组为不含骨桥蛋白的DMEM培养基，于不同时间点收集细胞。通过光镜观察培养的细胞形态，以细胞计数法测定生长曲线，应用流式细胞仪分析细胞周期，并行碱性磷酸酶(ALP)染色和活性测定及骨钙素(OCN)含量测定。结果：实验组细胞具有成骨细胞的形态学特征；实验组细胞生长曲线右移，细胞CdG，期比例平均增加13.17%(P<0.01)，S期比例减少74.93%(P<0.01)；实验组ALP染色呈阳性，且ALP活性、OCN含量均较对照组明显提高。结论：骨桥蛋白对BMSCs有促进成骨分化的作用。
关键词：骨桥蛋白；骨髓基质干细胞；成骨细胞
中图分类号：R329.2+8 文献标识码：A 文章编号：1673-7210(2009)12(c)-014-03
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