RP-HPLC测定拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度(2)
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图 1 HPLC色谱图
(A. 空白血清;B.供试品;a.拉莫三嗪;b.氯硝西泮;c.苯巴比妥)
Fig.1 HPLC chromatography
(A.Black serum substance; B.Sample; a.Lamotrigine; b.Phenobarbital;
c.Clonazepam)
2.2 对照品溶液和内标贮备液的制备
精密称取LTG、PBT和 CNZ 10.0、10.0和5.00 mg,分别置于25 ml量瓶中,加甲醇溶液溶解并定容配制成400.0,400.0和200.0 μg/ml的贮备液。
2.3 样本采集
清晨患者服药前抽取静脉血2 ml,室温3 500 r/min离心8 min,分离并留取血清,置-20℃冰箱保存,待测。
2.4 血样预处理
冰箱中取出血清,室温解冻,吸取血清200 μl,置5 ml的离心管中,加入CNZ贮备液 10 μl、乙酸乙酯1 ml,涡旋混合60 s,3 500 r/min离心10 min,吸取乙酸乙酯,于40℃用氮气吹干,加入甲醇溶液100 μl溶解,精密吸取取20 μl进样。
2.5 线性关系考察
2.5.1 标准血样精密量取“2.2”项下贮备液适量,用甲醇溶液稀释,加入适量空白人血清,制成含LTG l.0～50.0 μg/ml、PBT 1.0～150.0 μg/ml的系列浓度标准血样。
2.5.2 线性试验取“2.5.1”项下含LTG分别为1.00、2.00、5.00、10.00、20.00、50.00 μg/ml,含PBT分别为1 ......
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