佛山地区呼吸机相关性肺炎病原学与细菌耐药性变迁的研究(2)
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参见附件(3113KB，3页)。
1.3 细菌培养
在琼脂中加入2%～5%羊血于50℃制成血琼脂平板，80℃下制成巧克力琼脂平板。将初步处理后的痰液接种于平板上，分别放入普通和5%～10%CO2环境中，35℃ 20～24 h后观察菌落，行革兰染色，并做出初步鉴定，对连续2次培养出同一优势菌株且定量培养浓度≥105 cfu/ml的菌株确定为致病菌，并排除源于同一患者的重复菌株。
1.4 药敏试验方法
以纸片扩散法行抗菌药物敏感试验，质控菌株采用大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853，金黄色葡萄球菌ATCC25923，结果判断采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的指南进行。
1.5 统计学方法
采用SPSS 12.0统计软件，计数资料采用χ2检验进行统计分析。
2 结果
2.1 两个时间段病原菌变迁情况
120例VAP共分离出致病菌140株，统计2009年6月～2010年5月(I组)、2010年6月～2011年3月(Ⅱ组)两个时间段病原菌变迁情况发现，铜绿假单胞菌检出率在两年度均占首位，分别为21.33%及26.15%。见表1。
2.2病原菌的耐药性变迁情况
见表2。
3 讨论
VAP是指原无肺部感染的呼吸衰竭患者，在气管插管或气管切开行机械通气治疗48 h以后至拔管48 h以内发生的肺部感染[1]，是ICU内致死的主要原因，据文献报道，国外VAP发病率达9%～70%，病死率高达50%～69%。国内有医院调查，发病率为43.1%，病死率为51.6%。因此，根据本地区的病原学分布特点及耐药性变迁情况，及时经验性地选择有效抗感染药物是有效避免和减少VAP发生的重要措施。
笔者连续两年对佛山地区的呼吸机相关肺炎的病原学进行检测研究，结果显示，铜绿假单胞菌在两个不同的年度均占病原菌检出率的首位，分别为21.33%及26.15%，该研究结果与国内诸多报道一致。铜绿假单胞菌在医院中广泛存在，在许多器皿、器械和溶液中均能检出。据报道，在医院感染中由该菌引起者占10%，在烧伤和肿瘤病房、各种导管室和内镜室与检查室内可高达30%[2]。同时耐药性变迁研究显示，随着抗生素的滥用，铜绿假单胞菌对多种抗生素均产生了耐药性，且耐药率逐年增高，如对头孢噻肟100%耐药，对亚胺培南也产生了严重的耐药，耐药率由原来的0增至47.06%，对头孢哌酮/舒巴坦和头孢他啶的耐药率亦明显增高，耐药率分别由原来的12.50%和25.00%增至52.49%和41.17%，对阿米卡星、左旋氧氟沙星和哌拉西林/他唑巴坦等药物的耐药率也不同程度的增加。
另外，鲍曼不动杆菌和嗜麦芽假单胞菌在两年度中检出率也占前几位，检出率分别为17.33%、16.92%和8.00%、12.34%。不动杆菌是呼吸道的寄生菌之一，健康人体的皮肤和上呼吸道均可检出；嗜麦芽假单胞菌是一种革兰阴性菌，致病力不强，即使感染其严重程度也轻于其他革兰阴性菌，但在机体抵抗力降低的人群中可致病[3]，本组研究对象均是接受机械通气患者，免疫功能受损，故容易感染，耐药性变迁研究提示这两种细菌在两年内对多种抗生素的耐药性均有不同程度的增加，其中鲍曼不动杆菌对亚胺培南和头孢他啶的耐药率分别由15.38%和53.84%增加至54.55%和81.82%，而嗜麦芽假单胞菌对亚胺培南100%耐药。
肺炎克雷伯菌和洋葱假单胞菌的检出率两年来出现下降趋势，检出率分别由9.33%和14.67%降至1.54%和3.08%，但耐药性变迁研究显示其对多种抗生素的耐药性也逐年增高。大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肠球菌及黄杆菌的检出率无明显变化趋势。真菌在两年度中仍具有较高的检出率，分别为18.67%、20.00%，两年中无明显变化趋势，从药敏结果看，主要为白色念珠菌(共24株)，其次为热带念珠菌(3株)，对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、5-氟胞嘧啶、两性霉素B均未见耐药菌株。金黄色葡萄球菌的检出率有一定程度的增加，对万古霉素和利奈唑胺均敏感。早在1997年日本发现对万古霉素中度敏感的金黄色葡萄球菌(VISA)，2002年美国发现耐万古霉素的金黄葡萄球菌(VRSA)，目前全世界已报道多例VISA及VRSA感染的病例[4]，中国大陆已有异质性耐万古霉素金葡菌(hVRSA)的报道，湖南、浙江、广东、安徽等地hVRSA检出率分别为6.75%、1.79%、2.61%和6.70%，尚未发现VISA和VRSA[5]。
总之，随着抗生素的广泛应用以及新抗生素的使用，各种细菌对抗生素的耐药性不断变化，特别是耐药性经常以多重耐药为特点，因此临床医师应及时掌握病原学及耐药性的变迁，并合理选择抗生素，保证既能有效杀死细菌，又能防止细菌耐药性的产生，以促进VAP患者的顺利康复。
[参考文献] ......
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