影响血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验结果的常见因素及相应对策(2)
1.4.4 点样的量 点样的量太多易导致电泳图谱分离不良或产生拖尾现象;点样的量太少会使图谱区带显色过浅。加样量的多少与电泳条件、样品的性质、染色方法与检测手段灵敏度密切相关,如电泳后要用洗脱法定量时,每厘米加样线上加样量为0.1~0.5 μl,相当于5~1 000 μg;如是血清蛋白常规电泳分离时,加样量不超过每厘米1 μl,相当于60~80 μg。对策:对每一种样品的加样量应先做预实验;点样前应在滤纸上反复练习,掌握点样技术后,再以印章法使点样后的样品呈一条线涂于纤维薄膜[12]。2 电泳时的影响因素
2.1 搭桥
根据电泳槽裁剪大小合适的滤纸或脱脂纱布,使其对折后一端的长边能浸入缓冲液中,另一端的长边与支架前沿对齐。待滤纸完全浸透后,用玻璃棒轻轻挤压膜支架上的滤纸或纱布以驱赶气泡,使其紧贴在膜支架上[13]。
2.2 平衡
薄膜倾斜放置,电泳图谱会出现要靠近阳极越窄。薄膜搭在滤纸桥时应将无光泽面向下 ......
您现在查看是摘要页,全文长 3870 字符。