大鼠pEGFP-C3/BMP-2真核表达载体的构建(1)
[摘要] 目的 通过克隆大鼠的BMP2基因,构建EGFP-C3/BMP2基因的真核细胞表达载体。 方法 把大鼠的基因组DNA通过PCR获得BMP2,克隆构建载体pEGFP/C3-BMP2,并将其转化到大肠杆菌里面,最后进行重组真核表达载体pEGFP-C3-BMP2的构建和鉴定,并可观察其在真核细胞中的表达。 结果 以大鼠总DNA为模板扩增出1 200 bp左右的特异性条带,测序结果与Gene-Bank测序结果相比,翻译成的氨基酸序列相同并完全一致,并可在真核细胞中表达。对重组质粒pEGFP-C3/BMP2进行双酶切鉴定并测序,结果也完全一致。 结论 为进一步研究利用BMP2基因修饰骨组织工程骨,促进骨折愈合再生提供实验基础。[关键词] BMP2基因;PCR;真核表达载体构建
[中图分类号] R523 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2012)07(a)-0018-03 ......
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