1.资料与方法

    1.1 一般资料

    选取2008～2010年河北北方学院第一附属医院乳腺癌手术切除标本90例，腺瘤46例，病例均为女性。乳腺癌患者年龄30～73岁，平均52岁，中位年龄51.2岁，术前均未进行化学治疗；腺瘤患者年龄分布19～43岁，平均35岁，中位年龄33.5岁。

    1.2 标本处理及染色

    取材标本大小1 cm×1 cm×0.3 cm，10%中性甲醛液内固定24 h，乙醇梯度脱水，石蜡包埋，切片厚度5 μm，37℃温箱保存。免疫组化染色：兔抗人多克隆抗体VEGF和UPA由武汉博士的生物技术有限公司提供，SP免疫组织化学试剂盒和DAB显色剂由北京中杉金桥生物技术公司提供。切片脱蜡入水，3%双氧水阻断内源性过氧化物酶，微波抗原修复，正常山羊血清封闭，滴加一抗，室温过夜，滴加生物素标记二抗，37℃孵育30 min，滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液，37℃孵育30 min，DAB显色， 苏木精素复染，封片。选择已知UPA和VEGF阳性的乳腺癌切片作为阳性对照，阴性对照以PBS代替一抗 ......