诊断慢性粒细胞白血病的电化学生物传感器的研究(3)
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慢性粒细胞白血病是一种影响血液及骨髓的恶性肿瘤。主要的诊断方法有血象、骨髓象、中性粒细胞碱性磷酸酶检测(NAP)、细胞遗传学检测、分子遗传学检测等。然而，目前的分子诊断技术要求高，灵敏度不高，还无法在肿瘤发生的早期进行诊断，所以白血病的早期诊断是个亟待解决的问题。
随着慢粒早期诊断研究的不断深入，结合核酸适配子的特性，本实验在研究了大量的核酸适体、核酸适体生物传感器、核酸适体电化学生物传感器相关报道的基础上，结合本实验室已经筛选出的5个结合率高于40%的慢性粒细胞白血病适体，利用核酸适体易于标记的特点，结和胶体金技术，磁性纳米粒子两种纳米材料、电化学检测技术，用带羧基的磁性纳米粒子的已经标记有氨基的5个ssDNA核酸适配子和胶体金标记了巯基的5个ssDNA核酸适配子两两组合的适体，一个作为捕获分子，一个作为测定分子与CML K562结合后，利用磁铁将结合物固定在三电极系统分别为：玻碳电极为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂丝网辅助电极的丝网印刷电极传感器，经氧化还原反应将电极上的金原子转化成离子状态，利用电化学工作站检测对应的电流，筛选出最佳组合。利用最佳组合适体对与不同数量的CML K562结合，通过检测到的电流与CML K562的数量关系式，利用软件做非线性回归分析结果得到拟合曲线方程：Y = -0.205X/(62.73+X)，其中X为细胞数目，Y为DPV电流值。对慢性粒细胞白血病K562细胞的最低检测限可达到50个细胞。随着细胞数目的增加，DPV电流值增加，随后待适体均被结合以后基本到达一个平台，不再随着细胞数目的增加而增加。对样品重复测定10次，测得相对标准偏差RSD为3.78%，从而得到一种操作简单、灵敏度高、快速的早期诊断慢性粒细胞白血病的方法。
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