降浊颗粒对慢性肾衰竭大鼠肾组织纤维连接蛋白的影响(2)
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参见附件。
1.4.4 检测内容及方法 ①一般状态：精神状态、摄食、活动、体毛、尿量、体重及生存率；②血清Scr、BUN；③FN免疫组织化学染色(SP法)技术分析：采用免疫组化SP法检测肾小管-间质FN，第一抗体采用FN小鼠单克隆抗体，第二抗体采用超敏SP(鼠/兔)试剂盒，DAB显色。
1.5 结果判定
阳性：细胞胞浆或细胞膜出现棕黄色染色。按以下分析：①按平均灰度评分：平均灰度灰度数值从256到0，256到0代表从白到黑。平均灰度数值越小，表示染色越深，表达量越多。②按阳性细胞率评分：按染色阳性细胞占每个视野范围评分：3分：>相应视野50%；2分：占相应视野25%～50%；1分： 0.05)。见表1。
2.3 降浊颗粒对5/6肾切除大鼠FN阳性细胞率及平均灰度的影响
经治疗后，贝那普利组，降浊颗粒高、中、低剂量组FN阳性细胞率低于模型对照组，差异有高度统计学意义(P < 0.01)；降浊颗粒高、中剂量组，贝那普利组FN平均灰度较模型对照组增高，差异有高度统计学意义(P < 0.01)。降浊颗粒高、中剂量组FN表达与贝那普利组比较，差异无统计学意义(P > 0.05)。见表1、图2。
3 讨论
肾间质纤维化是各种原因所致的肾脏疾病慢性进展，最终导致肾功能衰竭的共同机制，而细胞外基质(ECM)的过度积聚是导致肾纤维化的最主要因素之一。研究证实，ECM合成和降解失衡是ECM聚集及肾小球功能损伤的主要原因[6]。ECM主要是由LN、FN、Col Ⅲ等成分组成。
FN是细胞外基质中一类重要的糖蛋白，主要位于小管间质区，彼此以纤维结构相连，对肾小管正常结构起着重要作用，正常情况下，FN在肾脏表达不明显，在肾间质病变时表达增强，进一步的研究又发现其变化与总的细胞外基质的变化趋势相一致，在炎症条件下，对介导细胞增殖和其他细胞外基质成分的沉积具有重要意义[7]。
在本研究中，模型对照组与假手术组比较FN表达增加，符合慢性肾衰竭病理改变。经治疗后，贝那普利组、降浊颗粒高、中、低剂量组FN阳性细胞率低于模型对照组，降浊颗粒高、中剂量组和贝那普利组FN平均灰度较模型对照组增高；降浊颗粒高、中剂量组降低FN表达疗效与贝那普利组相当。说明降浊颗粒能减少CRF大鼠肾组织FN的表达，干预肾间质纤维化，延缓大鼠CRF进展，尤其以高、中剂量组疗效最佳，其疗效与贝那普利相当。
[参考文献]
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[4] 刘培允.益肾降浊方灌肠治疗慢性肾衰竭的临床观察[J].中国医药导报，2008，5(24)：101.
[5] 熊有明，谢正兰.慢性肾衰竭的中医药治疗进展[J].医学综述，2009，15(20)：3155-3157.
[6] 赵慧颖，黄雯，黄海长，等.基质金属蛋白酶在大鼠肾小球硬化中的表达[J] ......
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