甘草酸二铵对脂多糖诱导下人牙周膜成纤维细胞表达前列腺素E2的影响(2)
 |
| 第1页 |
参见附件。
甘草酸二铵是从中药甘草中提取出来的重要的有效单体，其主要活性成分是甘草次酸[3]。甘草次酸属于皂苷分类中的三萜皂苷类化合物[4]，有促肾上腺皮质激素样的生物活性，临床用作抗炎药，并用于胃溃疡病的治疗，同时还具有非特异性的免疫加强作用[5]。目前在临床中主要用在病毒性肝炎的治疗，有非常显著的疗效[6]。另外，甘草酸二铵在机体损伤、感染和自身免疫性疾病方面的临床领域也有广泛的应用，主要是利用其有抗炎、抗病毒、保肝解毒及增强免疫的药理作用，它具有促肾上腺皮质激素样作用，作用于激素受体，抑制或激活酶活性，影响离子通道，影响物质的代谢活动，调节胆碱能神经的兴奋性，但是其并没有肾上腺皮质激素的副作用。近年来，甘草酸二铵的抗炎性引起了越来越多人的关注，有研究表明，观察甘草酸二铵对肝脏微粒体细胞色素P450[7]的活性研究，其结果表明它能抑制肝脏苯胺(CYP2E1)的活性，表现出疗效显著的抗炎性。另有学者发现[8]，甘草酸二铵是通过调控炎症介质NF-κB的表达来实现抗炎作用的。目前就甘草酸二铵在牙周病学领域的应用及研究的报道还比较少见。
本实验首先在体外成功建立了HPDLFs的模型，并运用免疫组织化学方法对其进行抗波形丝蛋白和抗角蛋白鉴定，确定其来源后，用不同浓度的LPS进行刺激，用免疫组织化学方法观察细胞表达PGE2的变化情况，其结果表明：LPS浓度为0.1 mg/L时，PGE2的阳性表达呈弱阳性，在10 mg/L时的阳性表达增强，当LPS的浓度继续增大为100 mg/L时，PGE2阳性表达逐渐减弱，并且牙周膜成纤维细胞出现凋亡现象。说明LPS对HPDLFs表现出明显的细胞毒性作用，能对HPDLFs产生致炎作用从而影响PGE2的表达，并且在10 mg/L时，PGE2的表达最强，所以此浓度作为后续实验的基础。
通过免疫组织化学方法观察到甘草酸二铵可以在一定程度上抑制LPS的致炎作用引起的PGE2的表达，用浓度为10 mg/L的LPS作为刺激因素干预HPDLFs，用不同浓度的甘草酸二铵进行诱导，其结果显示，随着甘草酸二铵浓度的增高，HPDLFs的PGE2阳性表达率逐渐减弱，当甘草酸二铵的浓度是0.1 mg/L时，PGE2的阳性表达强度无明显变化，但是当甘草酸二铵的浓度增加到100 mg/L时，PGE2的阳性表达强度明显减弱，对图片灰度值进行数据分析，其结果显示，随着甘草酸二铵浓度的增加，PGE2的阳性表达逐渐减弱，差异有统计学意义(P < 0.05)。本实验研究结果表明，甘草酸二铵可能使LPS诱导的PGE2表达下调。此外，Bhattacharjee等[9]研究发现在利什曼原虫多诺万菌的感染过程中，甘草酸通过抑制环氧合酶-2(COX-2)途径来达到抗炎的目的，而COX-2是PGE2合成所必需的关键性限速酶，所以甘草酸二铵可能通过抑制COX-2途径，间接抑制了PGE2的表达，此实验进一步支持了本实验结果的可靠性。
另外，卜丽梅等[10]通过建立大鼠的慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型研究发现，甘草酸二铵可以明显降低血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、TNF-α的表达水平，从而保护肺组织发挥抗COPD的作用，并且通过下调核因子κβ(NF-κβ)p50蛋白的表达，减少炎症因子的释放，发挥抗炎作用，减轻肺损伤的程度[11]。从而推测在本实验条件下， 甘草酸二铵可能通过抑制HPDLFs的NF-κβ活性及激活cAMP通路[12]多种途径来抑制PGE2的表达，进一步证实甘草酸二铵具有较强的抗炎作用。
本实验的主要目的是通过建立牙周膜成纤维细胞的体外模型，观察甘草酸二铵对致炎后的牙周膜成纤维细胞相关细胞因子表达的影响，希望能对临床牙周病治疗的临床研究提供新资料，为牙周病的防治开辟新思路。
[参考文献]
[1] 徐利东，李卫星，李霞，等.LPS介导的人牙周膜成纤维细胞损伤过程中TRAF-6基因的表达[J].山西医科大学学报，2008，39(4)：333-335.
[2] 张小蕾，梁海，苗琪，等.脂多糖对人牙周膜细胞COX-2蛋白表达的影响[J].临床口腔医学杂志，2010，26(3)：138-140.
[3] 黄冰冰，樊明文，杨祥良，等.桔梗、甘草及其组成的复方对口腔病原菌生长影响的体外实验[J].实用口腔医学杂志，2003，19(2)：148-150.
[4] 谢彦，徐淑永，曾和平.甘草属植物中三萜类化合物研究概述[J].广州化工，2004，32(1)：1-5.
[5] 张菲菲，夏庆银，胡少鹏，等.甘草酸对牙龈卟啉单胞菌生长影响的体外研究[J].广东牙病防治，2011，19(3)：121-123.
[6] 赵蓉，吕凌.甘草酸二铵药理研究和临床应用进展[J].亚太传统医药，2008，4(3)：31-36.
[7] 杨静，彭任琇，孔锐，等.18α-甘草酸二铵对大鼠肝脏细胞色素P450和Ⅱ相酶的影响[J].药学学报，2001，36(15)：321-324.
[8] Wang CY，Kao TC，Lo WH，et al. GlycyrrhizicAcid and 18β-Glycyrrhetinic Acid Modulate Lipopolysaccharide-Induced Inflammatory Response by Suppression of NF-κβthrough PI3K p110δand p110γ Inhibitions [J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(3289kb)。