倒卵叶五加及其复方佳蓉片对大鼠的抗衰老作用(1)
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[摘要] 目的 观察倒卵叶五加及其复方对亚急性衰老大鼠血清丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)以及睾丸组织中NO、iNOS含量的影响。 方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、倒卵叶五加组、佳蓉片组和维生素E组，每组12只。D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型，各组大鼠在腹腔注射D-半乳糖(正常组动物注射等量生理盐水)的同时，正常和模型组大鼠灌胃生理盐水[10 mL/(kg·d)]、其他各组依次给予倒卵叶五加[1 g/(kg·d)]、佳蓉片[6 g/(kg·d)]、维生素E[20 mg/(kg·d)]，用药50 d。分别检测各组大鼠血清MDA含量、GSH-Px活性、SOD活性及T-AOC。 结果 ①与正常对照组大鼠比较，模型组大鼠MDA含量明显升高，GSH-Px活性、SOD活性、T-AOC明显降低(P < 0.01或P < 0.05)；睾丸组织NO和iNOS含量明显升高(P < 0.01)。②与模型组比较，倒卵叶五加、佳蓉片、维生素E三组大鼠血清MDA、睾丸组织NO和iNOS含量明显降低(P < 0.01或P < 0.05)，GSH-P活性、SOD活性、T-AOC明显升高(P < 0.01)。 结论 倒卵叶五加和佳蓉片可升高衰老大鼠的抗氧化能力，具有明显延缓衰老的作用；机制可能与其抗氧化和降低衰老大鼠睾丸组织中NO和iNOS的含量有关。
[关键词] 倒卵叶五加；佳蓉片；大鼠；抗衰老；SOD活性；NO；iNOS
[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)02(b)-0012-03
衰老是正常的生理现象，亦是自然规律。抗衰老一直是医学界普遍关注的科学问题，但因衰老机制不明，防治衰老的药物实无根本突破。英国学者Hatman曾于1956年提出衰老的自由基学说，认为人体内存在清除自由基的防御系统，包括超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)及维生素、氨基酸、金属蛋白等；随着年龄的增长，机体抗氧化防御物质合成和活性下降，清除自由基能力降低，导致自由基代谢产物丙二醛(MDA)等大量堆积，加速机体的衰老[1-2]。中医认为，衰老与肾虚、肾精不足密切相关，补肾中药是中药延缓衰老的有效药物。佳蓉片是我科室20世纪90年代研制成功的主治更年期综合征新药(国药证字Z20026690)，经多年临床应用证实，不仅对更年期综合征具有明显疗效，而且发现能够显著改善衰老证侯，如减少面部皱纹、延缓绝经期、促进生育能力[3-5]。为什么佳蓉片会有如此功效呢？经检索和分析处方中倒卵叶五加可能具有抗衰老作用。为证实该推论，本研究设计了倒卵叶五加的抗衰老作用实验研究，以期探讨倒卵叶五加和佳蓉片对亚急性衰老大鼠血清MDA含量，GSH-Px和SOD活性、总抗氧化能力(T-AOC)、以及睾丸组织中NO、iNOS含量的影响；评价倒卵叶五加及其复方的抗衰老作用。
1 材料与方法
1.1 试剂
D-半乳糖，批号201112B09，北京化学试剂公司，采用生理盐水配成6%的溶液；SOD、MDA、GSH-P、T-AOC、 NO、iNOS试剂盒，南京建成生物工程研究所。倒卵叶五加浸膏，含生药量3.8 g/g浸膏，批号2011091201，由宝鸡饮片出品；佳蓉片，批号201111032，陕西博爱制药有限公司出品。
1.2 实验动物
SD大鼠，8周龄，雄性60只，体重200～250 g[由第四军医大学实验动物研究中心提供，动物合格证号：SCXK(军)字第2007-007号]。随机分为正常组、模型组、倒卵叶五加组、佳蓉片组、维生素E组，每组12只大鼠。D-半乳糖连续腹腔注射(320 mg/kg，50 d)建立亚急性衰老大鼠模型，各组大鼠在腹腔注射D-半乳糖(正常组动物注射等量生理盐水)的同时，正常和模型组大鼠灌胃生理盐水(10 ml/kg)、其他各组依次给予倒卵叶五加(1 g/kg)、佳蓉片(6 g/kg)、维生素E(20 mg/kg)，用药50 d。
1.3 抗氧化指标检测
大鼠末次给药后，4%水合氯醛腹腔注射麻醉，内眦取血2 mL，离心取上清；按照TBA法检测MDA含量，比色法检测GSH-Px，黄嘌呤氧化酶法检测SOD，铁还原法检测T-AOC等指标。
1.4 NO、iNOS含量
大鼠断头处死，每只大鼠取左侧睾丸组织约100 mg滤纸吸干水分后称重，冰浴条件下切成小米粒大小组织块，加入适量冷生理盐水，制成10%组织匀浆，4 000 r/min离心12 min，取匀浆上清，以冷生理盐水稀释成需要浓度，酶标仪测定组织蛋白含量，按照试剂盒说明进行操作 ......
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