RNA干扰瞬时受体电位阳离子通道1表达抑制缺氧诱导的胶质瘤血管内皮生长因子上调的实验研究(1)
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[摘要] 目的 探讨瞬时受体电位阳离子通道1(TRPC1)是否参与缺氧诱导的胶质瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达。 方法 通过RT-PCR和钙图检测技术观察U87细胞上表达的TRPC亚型;采用RNAi技术、real-time RT-PCR、免疫印迹和ELISA方法,在基因和外分泌蛋白水平观察TRPC1对缺氧U87细胞VEGF表达的影响。 结果 U87胶质瘤细胞表达TRPC1,TRPC3,TRPC4和TRPC5亚型。TRPC通道激动剂OAG增加了胞内Ca2+浓度,而TRPC通道阻断剂2-APB可抑制激动剂诱导的胞内Ca2+浓度增加。化学合成的siRNA-1,siRNA-2和siRNA-3分别减少TRPC1 mRNA到64%,39%和36%(P < 0.01);分别减少TRPC1蛋白到48%,29%和33%(P < 0.01)。siRNA-2和siRNA-3显著抑制了缺氧诱导的VEGF基因上调(P < 0.01)。同时缺氧U87细胞VEGF蛋白的分泌亦受到抑制(P < 0.01)。 结论 U87胶质瘤细胞表达功能性的TRPC通道,TRPC1参与缺氧诱导的胶质瘤VEGF表达。
[关键词] 神经胶质瘤;缺氧;瞬时受体电位阳离子通道1;血管内皮生长因子
[中图分类号] Q291 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)06(a)-0004-04
神经胶质瘤是最常见的原发性颅内肿瘤 ......
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