α平滑肌肌动蛋白红色荧光蛋白报告基因载体的构建及其在细胞中的表达(2)
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3 讨论
传统的观点认为特发性肺纤维化是由慢性炎症引起的，因此予以皮质激素和细胞毒性药物治疗IPF，可以抑制炎症造成的肺组织损伤，从而减轻和治疗肺纤维化[8-9]。但是临床治疗表明，使用糖皮质激素和细胞毒性抗炎治疗对于IPF无明确的疗效，并且许多确诊为IPF的病例中发现其病理组织炎性反应较轻微。近年来的研究表明，IPF的病理改变是由肺泡上皮细胞的损伤造成，反复的损伤刺激导致肺泡上皮细胞转分化为表达α-SMA的成肌纤维细胞，发生EMT。成肌纤维细胞由于其表达间质细胞标志物α-SMA，从而具有了收缩性，并且可以分泌大量的细胞外基质(ECM)沉积在肺组织中，成为IPF的主要效应细胞[10]。
TGF-β被认为是诱导器官纤维化(包括肺纤维化)的“总开关”，是促EMT作用最强的细胞因子，可以启动并完成整个EMT过程[10]。无论是离体实验或在体实验均证实，过表达的TGF-β能促进肺泡上皮细胞转分化，表达间质细胞标志蛋白α-SMA，加重肺纤维化[11-13]。因此，深入研究TGF-β诱导作用下上皮细胞α-SMA的分子调控机制对阐明IPF过程中肺泡上皮细胞发生EMT的病理机制非常重要。
红色荧光蛋白 (red fluorescent protein，RFP)是海葵中分离出来的一种生物发光蛋白，能够在紫外线激发下发出红色荧光[14]。而本研究所采用的DsRed是Clontech公司商业化的一种低毒、低寡聚化及成熟快的红色荧光蛋白突变体[15]。由于荧光蛋白基因可以在未受任何损坏的活体细胞中检测其表达 ......
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