体外缺血后处理对缺血再灌注损伤大鼠肾小管上皮细胞间质转变的影响
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2013年9月15日
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陈晖 王磊 翁小东 刘修恒 武汉大学人民医院泌尿外科;
【摘要】目的探讨缺血后处理对肾小管上皮间质转变的影响。方法应用NRK-52E建立有效的体外模型,实验分为对照组(COS):应用对照缓冲液培养,3 h后换完全培养基培养;缺血再灌注损伤组(IRI):应用缺血缓冲液,3 h后同样更换完全培养基培养;缺血后处理组(IPO):应用缺血缓冲液培养3 h,立即行体外缺血后处理,然后更换完全培养基。以上各组于处理3、6、12、24 h后收集细胞,Hoechst用于检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白表达水平。结果在经历缺血3 h后再灌注24 h,IRI组和IPO组有明显细胞凋亡,但IPO组凋亡明显较IRI组减轻(P0.05)。IRI组α-SMA随时间延长表达逐渐增强,在24 h时表达最强(P0.05);而IPO组随时间延长表达逐渐减弱,在24 h时达到最低值(P0.05)。IRI组TGF-β1在缺血再灌注3、6 h时表达较强,之后减弱;且IPO组表达与IRI组相似,但3、6 h时表达水平明显受到抑制。IRI组CTGF在缺血再灌注3、6 h时表达较强,之后减弱;而IPO组表达各时间点较COS组没有明显变化。结论体外缺血再灌注损伤可以诱导肾小管上皮细胞α-SMA的表达,诱导上皮细胞间质转化;而原因可能与激活TGF-β1,进而也抑制基质蛋白的降解,促进基质蛋白CTGF的表达等有关;同时IPO能有效抑制α-SMA、TGF-β1、CTGF的表达,说明其能抑制间质转化的发生。
【关键词】 缺血后处理 上皮细胞间质转变 肾纤维化
【基金】国家自然科学基金资助项目(编号30901494)
【分类号】R692.6
肾缺血再灌注损伤不仅可以在短期内引起肾功能不全、衰竭,而且还可以导致慢性肾小管间质纤维化。肾小管间质纤维化是各种病因的肾脏疾病进展到终末期肾病的必要环节,而肾小管上皮细胞间质转变(EMT)在肾纤维化过程中扮演重要角色。因此,本研究利用笔者已经建立的成熟的体外模型
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