新型肠道病毒89型结构蛋白VP1的构建表达及序列分析
http://www.100md.com
2013年12月5日
 |
| 第1页 |
参见附件。
侯俊 白冰珂 胡燕 沈宏辉 李瑞生 孙艳玲 罗声栋 貌盼勇 解放军三〇二医院实验技术研究保障中心;
【摘要】目的研究克隆表达新型肠道病毒89型VP1结构蛋白,并进行活性鉴定和序列分析。方法分离肠道病毒89型VP1结构蛋白全基因,克隆入原核表达载体PET-28构建重组质粒pH-VP1,在大肠埃希菌BL21中进行表达,检测表达产物的特异性及活性。将EV89 VP1核酸序列与Genbank数据库中的序列进行比对并建立系统进化树。结果重组质粒在1 mmol/L的IPTG 37℃诱导7 h后可诱导表达得到约33 kD的蛋白,经Western Blot实验检测证明表达的融合蛋白具有EV89抗原的活性。分离的EV89病毒其VP1区核酸序列与Genbank数据库中仅有的3株EV89序列同源性分别为86.4%、85.9%、85.6%。结论成功构建EV89重组蛋白,其表达产物具有良好的特异性及活性,可进一步用于VP1检测方法的研制。进化分析表明,分离的EV89 VP1区与Genbank数据库中其他分离株亲源性较远。
【关键词】 肠道病毒型 VP蛋白 原核表达
【基金】国家自然科学基金资助项目(项目编号:3400382)
【分类号】R446.5
肠道病毒自1969年首次被发现以来,在全世界引起了规模不等的爆发流行。自此,人们开始不断意识到肠道病毒所带来的严重公共卫生问题。在我国肠道病毒已成为对中国人危害最大的疾病之一。近年来随着新型肠道病毒不断出现,肠道病毒的致病性已引起人们高度重视。科研人员针对各种
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(3896kb)。