RNA干扰HPV E6下调eIF4E转录表达抑制宫颈癌Hela细胞增殖并影响细胞周期进程研究(1)
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[摘要] 目的 探讨宫颈癌Hella细胞中干扰HPV E6对eIF4E表达的调控，探寻HPV E6促癌的新途径，为宫颈癌诊断和治疗提供新靶点。 方法 构建高效的靶向HPV18 E6的shRNA质粒(shE6)并测序，而后转染人宫颈癌Hela细胞，荧光显微镜及流式细胞术检测转染效率。而后以Real-time PCR检测E6及eIF4E的mRNA水平，采用CCK-8法检测Hela细胞增殖能力的改变，流式细胞术检测细胞周期。 结果 测序结果显示成功构建shE6 质粒。shE6-3转染人宫颈癌Hela细胞后48 h，E6及eIF4E mRNA表达的抑制率分别约为80%，76%。shE6-3对Hela细胞的增殖活性在48 h的抑制效果最明显，增殖抑制率约为21%；相对于NC组，shE6组G0/G1期细胞比例显著增高，而S期比例减少，G2/M期未见明显变化。 结论 RNA干扰HPV E6能够下调eIF4E转录表达，抑制宫颈癌Hela细胞增殖，并阻滞细胞周期于G0/G1期。eIF4E有望成为宫颈癌防治的潜在靶点。
[关键词] 宫颈癌；E6；真核细胞翻译起始因子；RNA干扰
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2014)01(b)-0004-04
Study of RNA interference of HPV E6 down regulates the transcripiton of eIF4E and inhibits the cell proliferation and cell cycle of Hela cells
WANG Sen1 GAO Min2 ZHAO Yi1 ZHU Wei1 JIANG Enping1 KANG Haixian1 YAO Yunhong1 HU Xinrong1
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王森 高敏 赵毅 朱伟 姜恩平 康海仙 姚运红 胡新荣 广东医学院肿瘤研究所病理教研室;广东省东莞市人民医院病理科;
【摘要】目的探讨宫颈癌Hella细胞中干扰HPV E6对eIF4E表达的调控,探寻HPV E6促癌的新途径,为宫颈癌诊断和治疗提供新靶点。方法构建高效的靶向HPV18 E6的shRNA质粒(shE6)并测序,而后转染人宫颈癌Hela细胞,荧光显微镜及流式细胞术检测转染效率。而后以Real-time PCR检测E6及eIF4E的mRNA水平,采用CCK-8法检测Hela细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞周期。结果测序结果显示成功构建shE6质粒。shE6-3转染人宫颈癌Hela细胞后48 h,E6及eIF4E mRNA表达的抑制率分别约为80%,76%。shE6-3对Hela细胞的增殖活性在48 h的抑制效果最明显,增殖抑制率约为21%;相对于NC组,shE6组G0/G1期细胞比例显著增高,而S期比例减少,G2/M期未见明显变化。结论 RNA干扰HPV E6能够下调eIF4E转录表达,抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并阻滞细胞周期于G0/G1期。eIF4E有望成为宫颈癌防治的潜在靶点。
【关键词】 宫颈癌 E 真核细胞翻译起始因子 RNA干扰
【基金】国家自然科学基金项目(编号81302244) 广东省自然科学基金面上项目(编号S2012040006383) 广东省医学基金立项课题(编号B2013293) 广东省高等学校科技创新(重点)项目(编号2012KJCX0057)
【分类号】R737.33
真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translationinitiation factor 4E,eIF4E)是新近发现的原癌基因,与肿瘤的发生发展密切相关。eIF4E是帽依赖性翻译起始必需的且起限速作用的翻译启始因子,被认为是控制真核细胞翻译的主要开关之一。人eIF4E基因定位于染色体4q21~q25,编码2
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