提高Lipofectamine2000对PC12细胞转染效率的研究(3)
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2.5 氯喹、亚精胺对PC12细胞神经轴突生长的影响
转染试剂Lipofectamine2000对转染前后的PC12细胞及经NGF诱导后产生的神经轴突长度无影响。氯喹、亚精胺对PC12细胞的神经轴突生长数量与长度无影响;也间接表明在转染过程中加入9 μmol/L氯喹及8 μmol/L亚精胺对PC12细胞的功能无影响。见表1。
表1 氯喹、亚精胺对PC12细胞神经轴突生长的影响(x±s)
2.6 本法与4种常用脂质体转染试剂对PC12细胞转染效率的比较
本文以pEGFP-N1为报告基因,用本法与常用的FuGENE、PolyJet、Lipofectamine LTX and Plus、Lipofectamine2000等4种脂质体转染试剂对PC12细胞转染效率进行了比较,结果:本法的PC12细胞转染率为40.5%,其它四种脂质体转染试剂对PC12细胞转染效率分别为10.5%、8.6%、11.8%及15.3%。本法对PC12细胞的转染效率明显高于其他4种脂质体转染法,差异有高度统计学意义(P < 0.01)。见图3。
图3 本法与4种常用脂质体转染试剂对PC12细胞转染效率的比
3 讨论
PC12细胞具有类似神经细胞的形态学改变及生理学特征而作为神经研究的模式细胞[1]。氯喹、亚精胺能明显提高PC12细胞的转染效率,且不影响PC12细胞的活性与正常功能,与文献报道一致[1,8]。
氯喹是一种疏水性的弱碱,在PC12细胞转染过程中能进入细胞吞噬溶酶体,在酸性环境下被质子化 ......
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