蝎肽抗菌凝胶对痤疮丙酸杆菌的抑制作用(2)
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1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验菌株 购自中国典型培养物种保藏中心的2个痤疮丙酸杆菌菌株，(编号AB6919、AB11827)。
1.1.2 试验药物 武汉摩尔有限公司提供的歇肽抗菌凝胶临床应用制剂，无菌生理盐水和氨苄青霉素钠粉针剂。
1.1.3 仪器和试剂 酶标仪biotech ELX800，显微镜，恒温培养箱，BS110S型电子天平，高压灭菌锅，厌氧发生袋，BHI粉，厌氧发生剂：MGC Anaero Pack. Anaero，厌氧指示剂。
1.2 试验方法
1.2.1 痤疮丙酸杆菌的培养 称取37 g 生物合成人胰岛素(BHI)粉末溶于1 L水中，灭菌后制成BHI培养基，将两株痤疮丙酸杆菌菌株分别接种到BHI培养基中，在厌氧发生袋中37℃厌氧培养48 h并振摇均匀备用。另取少量菌珠涂于载玻片上，采用革兰染色的方法固定染色，然后将其置于100×100的油镜下执行镜检，镜下可见紫色杆菌，微弯呈棒状或杆状，无杂菌生长(图1)。
图1 痤疮丙酸杆菌
1.2.2 倍比稀释蝎肽抗菌凝胶溶液 将两种菌株培养的溶菌溶液稀释100倍(OD600约为0.002)；将1 mg/mL的蝎肽抗菌凝胶溶液进行倍比稀释：取8支灭菌试管并各加入蒸馏水1.0 mL，取蝎肽抗菌凝胶溶液1.0 mL加入第1管中，充分混匀后取1.0 mL加入第2管，以此类推，第8管中取1.0 mL液体并将其弃去(表1)。
表1 药物稀释度和相应药物含量
1.2.3 菌株和药液培养 向无菌96孔板中每孔加入上述稀释的含有痤疮丙酸杆菌的溶液80 μL ......
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