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编号:12707724
依达拉奉对肺泡Ⅱ型上皮细胞NF—κB和IL—6,IL—8表达及凋亡的影响(2)
http://www.100md.com 2014年3月5日 王媛媛 曹建 陈勤 等
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    参见附件。

     [Key words] Edaravone; Oxidative stress; NF-κB; IL-6; IL-8; Lung epithelial type Ⅱ cells; Apoptosis

    急性肺损伤发病过程中,细胞因子可能通过抑制炎症细胞凋亡延长炎性反应时间,促进肺泡上皮细胞凋亡而参与急性肺损伤的炎性反应过程[1]。肺泡Ⅱ型上皮细胞是肺部特异性细胞,可以分泌肺泡表面活性物质,能降低肺泡表面张力,对稳定肺泡形态有一定作用。Ⅱ型细胞又是肺泡的储备细胞,当肺上皮遭受损害,会导致其增生,它是急性肺损伤发病过程中的重要效应细胞[2]。依达拉奉目前研究表明具有清除自由基,抑制氧化性应激,抑制细胞凋亡,可用于治疗氧化应激介导细胞凋亡的神经退行性疾病[3]。本研究通过建立氧化应激诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞细胞凋亡模型,探讨依达拉奉对肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的影响及其与炎症因子的关系。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    RPMI1640培养基HEPES,四氮唑蓝(MTT),二甲基亚砜(DMSO)小牛血清(Gibico公司),IL-6,IL-8 ELISA试剂盒:武汉博士德公司。AnnexinⅤ-PI凋亡检测试剂盒(北京宝赛生物技术有限公司),碱性磷酸酶(AP)显色底物,anti-NF-κB,小鼠单抗辣根酶标记兔抗山羊IgG;anti-β-actin山羊单抗(SantaCruz产品)。依达拉奉(先声药业)。

    1.2 人肺泡Ⅱ型上皮细胞的培养及诱导氧化应激

    人肺泡Ⅱ型上皮细胞由南昌大学第二附属医院呼吸内科实验室冻存。细胞用含10%小牛血清的RPMI1640培养液在5%CO2,37℃,饱和湿度的细胞培养箱培养,细胞呈贴壁生长,用0.25%的胰酶和0 ......

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