索拉非尼对肝癌患者血清中肿瘤相关miRNAs的影响(2)
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1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2011年10月～2012年9月在绍兴第二医院及浙江大学医学院附属第一医院接受治疗的6例肝癌患者的血清样本。所有患者均经组织病理学检测证实为肝细胞肝癌，诊断均符合2001年肝癌临床诊断标准和临床分期。所选病例应同时满足以下条件：不适合手术治疗，体力状况ECOG评分≤2分，Child-Pugh评分A、B级，预计生存时间>12周，血小板(PLT)≥ 60×109/L，血红蛋白(Hb)≥85 g/L，谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)≤正常值上限3倍以内。本组研究对象中男4例，女2例，平均年龄(52.6±14.8)岁；肿瘤直径8.7～15.4 cm；病灶数目1～3个，其中单发2例、多发4例；甲胎蛋白(AFP)平均值(837.42±178.75)ng/mL。
1.2 主要试剂和仪器
mirVanaTMmiRNA Isolation Kit(Ambion公司，美国)；miScript Reverse Transcription Kit(Qiagen公司，德国)；SYBR Green I(10000×)和PlatinumR Taq DNA聚合酶(Invitrogen公司，美国)；MMLV反转录酶和RNA酶抑制剂(epicentre公司，美国)；miRNA芯片由丹麦Exiqon公司制作，上海康成生物工程有限公司代理；DU-730紫外分光光度计和PRISM 7900实时荧光定量PCR仪(ABI公司 ......
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