Ang—1和Tie2在高血压患者内皮祖细胞中表达水平及临床意义研究(2)
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1.2.3 Ang-1和Tie2水平测定
所有研究对象入选前1周内未服用任何降压药和抗氧化剂,清晨分别抽取空腹外周血20 mL置入无菌肝素抗凝管内,加入Ficoll液4℃离心分离单个核细胞层并采用差速贴壁法纯化内皮祖细胞。
1.2.3.2 采用Western-blot法测定Tie2酪氨酸磷酸化水平 分别提取各组内皮祖细胞总蛋白后取20 μg,行聚丙烯酰胺凝胶电泳,4℃转膜12 h,蛋白封闭,加入抗Tie2酪氨酸磷酸化一抗、二抗,显影、压片。胶片经图像分析系统测得Tie2磷酸化/β-actin光密度比值反映体内活化Tie2受体表达水平。
1.3 统计学方法
2.1 各组内皮祖细胞Ang-1、Tie2 mRNA表达和Tie2酪氨酸磷酸化水平比较
3 讨论
原发性高血压形成的高血流应切力可直接损伤血管内皮细胞。血压越高,损伤越大,越难以修复,进而发展为动脉粥样硬化、冠心病等严重合并症[5-7]。内皮祖细胞是具有增殖分化为血管内皮细胞的一类前体细胞,与新生血管生成、内皮细胞修复有关[8]。然而越来越多的研究发现[9-11],高血压患者循环内皮祖细胞数量减低、功能障碍,内皮细胞得不到修复与更新,病情无法逆转。如何解释这一现象对于疾病的控制至关重要。
Tie2是一类酶联受体,广泛表达于内皮细胞及内皮祖细胞上,Ang-1、Ang-2是其主要配体,Ang-1能保持血管内皮的稳定性 ......
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