核转录因子、cMYC在弥漫大B细胞淋巴瘤亚型中的表达及意义(2)
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1.2 免疫组化方法及阳性结果判定
患者淋巴结组织蜡块标本经10%中性福尔马林溶液固定,常规脱水,石蜡包埋,4 μm厚切片,切片常规脱蜡水化;0.3%H2O2阻断内源性过氧化物酶,10%小牛血清封闭切片,滴加一抗,4℃过夜。PBS洗后滴加广谱生物素化二抗(1∶200),SP复合物(1∶200),DAB显色,苏木精复染胞核,脱水,透明,封片。分别设相应的阳性、阴性、空白对照。NF-κB p65及cMYC的主要阳性染色部位在细胞核和细胞浆。NF-κB p65及cMYC阳性表达为棕黄色或棕褐色细小颗粒。用已知阳性片为阳性对照,所有病理标本切片用PBS液代替一抗作阴性对照。阳性反应为细胞浆内或细胞核内出现黄色或棕黄色颗粒。阳性反应为细胞浆内或细胞核内出现黄色或棕黄色颗粒,阳性反应细胞> 10%为阳性结果。
3 讨论
DLBCL是常见的NHL之一,尽管美罗华为基础的化疗方案在DLBCL中取得了很大成功,然而高危患者的预后仍然较差,尤其是在ABC亚型治疗效果不佳。在临床工作中,识别特殊患者进行规范的分层治疗,成为一个亟待解决的问题。
目前,IPI是公认的DLBCL的独立不良预后因素,IPI为3~5分患者预后明显差于0~2分患者,许多学者提出以此进行分层治疗,最近有文献报道NF-κB与IPI同为DLBCL的独立不良预后因素,NF-κB阳性表达预后差[3]。NF-κB是广泛存在于真核生物细胞内的一种可诱导的转录因子家族蛋白,与淋巴瘤的发生、发展密切相关。董佑红等[4]报道DLBCL患者组织中NF-κB的表达与IPI评分相关 ......
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