黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用(2)
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黑青稞是一种生长在高原低温低氧环境中的农作物，其表皮中含有丰富花色苷，黄酮及类黄酮等物质，药理学研究表明，花色苷具有抗氧化、抗炎、降血脂、抑制肿瘤生成等生物学活性[3-4]，笔者在前期动物实验中发现：黑青稞籽皮提取物能够有效延长常压缺氧及断头小鼠的存活时间，说明黑青稞籽皮提取物具有耐缺氧功效；同时，通过细胞学实验结果发现：黑青稞籽皮提取物对心肌细胞的缺氧/复氧损伤具有良好的保护作用；经过对黑青稞籽皮提取、分离，检测，发现黑青稞籽皮提取物含有主要的花色苷物质为氯化花翠素。为了探讨黑青稞籽皮提取物抗缺氧作用的可能机制，笔者进行了相关实验研究，以期扩展花色苷的应用领域。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞H9c2细胞(购自上海基免生物科技有限公司)。
1.1.2 主要试剂黑青稞籽皮提取物(本实验室提供)；达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)(Gibco，批号：1237443)；胎牛血清(Hyclone，批号：NXC0582)；连二亚硫酸钠(国药集团，批号：20120413)；C膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)凋亡检测试剂盒(凯基生物技术发展有限公司，批号：130411)；线粒体膜电位检测试剂盒(编号：C2006)及活性氧检测试剂盒(编号：S0033)(碧云天生物技术研究所)；二辛可酸(BCA)蛋白定量试剂盒(Pierce，批号：OC185139)；抗体：B细胞淋巴瘤白血病-2(Bcl-2)(编号：#2870S)，Bcl-2相关X蛋白(Bax)(编号：#2772S)，丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt，编号：#4691S)，磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(pAkt，编号：#4056S)，甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH，编号：#2118S)，均购于Cell Signaling Technology。
1.2 心肌细胞培养
H9c2细胞置于含有15%胎牛血清的高糖DMEM培养液中，在37℃，5%CO2条件下培养 ......
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