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编号:12620654
结直肠腺癌组织中c—JUN氨基末端激酶、E—选择素、血管内皮生长因子—D蛋白表达的临床意义(2)
http://www.100md.com 2015年2月15日 中国医药导报2015年第5期
     1 资料与方法

    1.1 一般资料

    收集2012年8月~2014年9月于北京市海淀医院普通外科手术切除的50例结直肠癌组织和20例正常大肠组织(非结直肠癌)。结直肠癌患者50例中,男37例,女13例;年龄37~78岁;结直肠癌Dukes分期:A期5例,B期17例,C期20例,D期8例;有淋巴结转移者35例,无淋巴结转移者15例;术前均未接受放、化疗及免疫治疗,术后均经病理检查证实。非结直肠癌患者20例中,男14例,女6例,年龄30~72岁。本研究经医院伦理委员会审查通过,患者均签署知情同意书。

    1.2 c-JUN、E-selectin、VEGF-D蛋白检测

    试剂盒购自武汉博士德生物技术公司,所有组织均经10%甲醛固定,石蜡包埋,制成4 μm厚病理切片,贴附于多聚赖氨酸的载玻片上。采用免疫组化SP法检测,一抗均为鼠抗人单克隆抗体,DAB显色,全部操作过程均按试剂说明书进行,用已知阳性切片作为阳性对照,磷酸盐缓冲液(PBS)替代一抗作为阴性对照。

    1.3 结果判定标准[4]

    采用双人双盲法判定,免疫组化阳性初步判定标准为细胞核或细胞核与细胞质中同时出现棕黄色颗粒,①阳性细胞百分比评定标准:随机选取4个高倍镜视野,每个视野计数100个细胞,计算阳性细胞的百分比,0分为阳性细胞数百分比为0 ......
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