胎儿卵巢的形态学及细胞凋亡的观察与研究(2)

http://www.100md.com 2015年7月15日 中国医药导报2015年第20期

     1 对象与方法

    1.1 对象

    选择2013年1～12月由于母亲或社会因素于广东省计划生育科学技术研究所(以下简称“我院”)行妊娠终止的病例，所有患者均采用米非司酮联合前列腺素进行引产。收集孕24～32周引产的女性胎儿卵巢组织18例。其中24～27周(中期妊娠)胎儿卵巢8例，28～32周(晚期妊娠)胎儿卵巢10例。本研究经我院医学伦理委员会讨论通过，收集的胎儿卵巢组织也均得到胎儿母亲的同意并签署知情同意书。

    1.2 方法

    卵巢组织投入10%福尔马林溶液固定，经脱水、浸蜡、包埋。最终切成3 μm石蜡切片。石蜡切片经脱蜡浸水后，常规HE染色后显微镜下观察胎儿卵巢组织。细胞凋亡检测试剂盒购自罗氏公司，具体操作步骤参照试剂盒说明书进行，用荧光显微镜拍照后，二氨基联苯胺-过氧化氢显色，设立阳性对照(用DNA酶处理切片)和阴性对照(用PBS代替末端脱氧核糖核酸转移酶)。结果判断：荧光显微镜下阳性细胞呈黄绿色荧光，二氨基联苯胺(DAB)显色后阳性定位于细胞核，或细胞核、细胞浆同时着色，呈棕黄色。

    2 结果

    2.1 HE染色结果观察

    显微镜下观察，24～27周胎龄卵巢原始卵母细胞较多 ......