Lenti—Toll样受体4—siRNA的构建及对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的影响(3)
1.3 统计学方法
采用SPSS 17.0统计软件对数据进行分析和处理，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 阳性克隆的PCR鉴定
载体上的引物进行PCR鉴定阳性克隆，经琼脂糖凝胶电泳检测其大小和完整性，每个序列阳性克隆各取3个样品菌种送上海美季公司测序，结果通过Chromas软件进行分析。鉴定电泳结果显示，TLR4 vshRNA片段已经成功插入质粒，挑选的阳性克隆菌液测序结果与实验要求的DNA序列完全一致。见图1。
2.2 慢病毒滴度测定
测定前1 d为293T细胞铺板，每孔加4×104个细胞，在Eppendorf管中加入90 μL无血清培养基，将10 μL病毒原液加入到第1个管中，混匀后取10 μL加入到第2个管中，如此分别稀释为1/10～1/100万，感染293T细胞 ......
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采用SPSS 17.0统计软件对数据进行分析和处理，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 阳性克隆的PCR鉴定
载体上的引物进行PCR鉴定阳性克隆，经琼脂糖凝胶电泳检测其大小和完整性，每个序列阳性克隆各取3个样品菌种送上海美季公司测序，结果通过Chromas软件进行分析。鉴定电泳结果显示，TLR4 vshRNA片段已经成功插入质粒，挑选的阳性克隆菌液测序结果与实验要求的DNA序列完全一致。见图1。
2.2 慢病毒滴度测定
测定前1 d为293T细胞铺板，每孔加4×104个细胞，在Eppendorf管中加入90 μL无血清培养基，将10 μL病毒原液加入到第1个管中，混匀后取10 μL加入到第2个管中，如此分别稀释为1/10～1/100万，感染293T细胞 ......
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