1.3 MTT法测定细胞活力

    细胞以1×105个/mL接种于96孔板，同“1.2”项方法培养，加5 g/L MTT 20 μL培养4 h，弃培养基后加DMSO 150 μL溶解结晶。用全自动酶标仪检测490 nm吸光度。重复3次。

    1.4 GSH水平、LDH活性及MDA含量测定

    细胞培养液离心后取上清，按相应试剂盒说明书测GSH水平、LDH活性和MDA含量，重复3次。

    1.5 SOD活性测定

    细胞用0.25%胰酶消化，离心，PBS溶解沉淀，超声破碎，按SOD试剂盒说明书测SOD活性，重复3次。

    1.6 Real-time PCR检测

    TRIzol法提取细胞总RNA，逆转录合成cDNA，定量PCR扩增，扩增体系：SYBR Premix Ex TaqⅡ 10 μL，上下游引物各0.5 μL，2 μL cDNA，ddH2O 7 μL。反应条件：94°C，2 min；94°C，30 s；62°C，30 s，30个循环；72°C，5 min。低氧诱导因子(HIF-1α)上下游引物为5'-ATCTGAGGACACGAGCTGCCT-3'和5'-CAGAAGGACTT-GCTGGCTGATC-3' ......