单色多重荧光实时定量PCR测定端粒长度(3)
扩增效率是影响定量PCR可靠性的最重要因素[14]，由于实时定量PCR通过Ct值来计算模板的起始量，因此所有样本的扩增效率一致显得很重要。端粒的定量PCR利用两个基因的扩增来计算端粒长度，其中任何一个都有可能存在效率误差，因而对效率误差尤为敏感。有文献报道了端粒定量PCR可接受的效率范围为95%～103%[16]，但这个范围只是象征性的，如果所有的样本的扩增效率一致，具体的数值并不重要，80%和100%一样可靠，因为导致效率误差的是样本之间扩增效率的差别[15]。另一个与扩增效率有关的问题与标准品有关。端粒定量PCR通过外部标准曲线法计算端粒长度，一般来说应使用任一个待测样本，或多个样本的混合作为标准品。因为在血样本的保存及DNA的提取过程中有很多化学物质可抑制PCR反应 ......
您现在查看是摘要页，全文长 3023 字符。
您现在查看是摘要页，全文长 3023 字符。