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编号:12956679
1型糖尿病小鼠骨髓EPCs的培养和功能研究(2)
http://www.100md.com 2016年8月5日 《中国医药导报》2016年第22期
     1.2.5 EPCs小管的形成 将Matrigel胶4℃过夜冻融,在层流超净台上,Matrigel包被48孔培养板,并放置 37℃,5% CO2环境下聚合30 min。用0.25%胰酶(含0.02% EDTA)消化并收集贴壁细胞,每孔加入500 μL细胞悬液,37℃,5% CO2培养箱培养16 h。显微镜下观察管腔样结构并拍照,计数高倍镜下5个视野的管腔长度,实验重复3次,取均值。

    1.2.6 EPCs的迁移 取培养7 d的小鼠骨髓EPCs,用0.25%胰酶(含0.02%EDTA)消化并收集细胞。将100 μL细胞悬液缓慢加入Transwell小室的上室。将下室加入500 μL含10%胎牛血清的1640培养基。置于CO2培养箱中培养16 h,检测时移去上室培养液,100%甲醇固定,2.5 g/L结晶紫置于37℃暖箱染色30 min,显微镜下观察并拍照,计数高倍镜下5个视野的迁移细胞数,实验重复3次,取均值。

    1.3 统计学方法

    采用SPSS 10.0统计学软件进行数据分析,计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示 ......
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