温度、冻存液体积和操作时间对小鼠卵子Cryotop玻璃化冻融复苏率的影响(3)
玻璃化是由液相直接转变为一种玻璃状的固体状态的过程[15]，避免了晶体态的出现，从而有效防止了冰晶对细胞的物理损伤。实现玻璃化状态的关键是提供足够快的降温速度，而降温速度又与冷冻载体的类型和液体体积有关。目前常用的卵子玻璃化冷冻载体有拉伸麦管，石英毛细管，电镜铜网和Cryotop聚乙烯薄片载杆，其能达到的降温速度分别为5521[16]、10 000[17]、3000℃/min[18]和37 500℃/min[16]。本实验选用以上4类载体中热传导降温效率最高的Cryotop载具对小鼠卵母细胞进行玻璃化冷冻，并通过比较加载不同体积的CPA微滴，来探讨液体体积这一因素对冻融效果的影响。结果发现，不同CPA液滴体积加载组间复苏率比较，差异无统计学意义(P > 0.05)。Kuwayama[19]提出Cryotop法时认为加载在塑料薄膜带(宽0.4 mm，长20 mm，厚0.1 mm)上的包含有卵母细胞的保护液小滴体积应<0.1 μL ......
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