鼠胚胎成纤维细胞三维培养修复大鼠全层皮肤缺损的效果及其机制(2)
1 材料与方法1.1 动物
孕龄16~19 d的SD大鼠10只;雄性SD大鼠60只,5月龄,体重200~250 g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,动物合格证号:SCXK(京)2012-0001。
1.2 主要仪器
VD-1320洁净工作台(德国Hermle),3111CO2培养箱(美国Thermo),倒置生物显微镜(北京市半导体设备厂),培养皿,手术刀柄、刀片,巾钳,持针器,有齿镊,药杯,弯盘,缝合针,蚊式钳,消毒钳,剪刀,眼科剪,眼科镊,缝合线等。
1.3 主要试剂及药品
DMEM培养基、胰蛋白酶、胶原酶、小牛血清,均购于美国GIBCO公司;人IL-6、TGF-β1 ELISA试剂盒,购于北京达科为生物技术有限公司;苏木精染色液、伊红染色液,购于广州市欣源贸易有限公司,批号分别为474077、C0109。
1.4 方法
1.4.1 成纤维细胞培养 将10只处于妊娠16~19 d的大鼠处死,酒精浸泡消毒,无菌条件下分离胚胎 ......
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