1.2 细胞培养

    细胞系为鼠胃癌细胞株MFC，购自中国科学院上海细胞库。细胞培养、传代细胞于含10%小牛血清的RPMI1640完全培养基中，常规加入100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素于培养基，在37℃、5%CO2、饱和湿度孵箱培养。0.1%胰蛋白酶消化传代。实验均采用对数生长期细胞。

    1.3 MTT法检测雷利度胺对MFC细胞增殖的抑制作用

    取对数生长期的细胞，0.1%胰蛋白酶消化，每孔加200 μL细胞悬液并接种于96孔培养板中。在预实验中发现低浓度雷利度胺(1.25、2.5、5、10 mg/L)对MFC细胞无明显抑制作用，故本研究中选择雷利度胺浓度为20、40、60、80、100、120 mg/L。各组均按每孔5×104/mL细胞数接种96孔板，每组设4复孔，同时设置空白对照组、溶剂对照组和调零孔。细胞贴壁后加入不同浓度雷利度胺，使其终浓度分别为20、40、60、80、100、120 mg/L。培养24、48、72、96 h后，加20 μL/孔MTT，继续培养4 h弃上清液 ......