3 讨论

    3.1 检测波长的选择

    维生素B6的紫外谱图在218、256、292、326 nm处有最大吸收，褪黑激素的紫外谱图在198、224、278 nm处有最大吸收，褪黑激素在样品中含量较低，兼顾两种成分综合考虑，选择278 nm作为检测波长。

    3.2 色谱条件的优化

    维生素B6为水溶性维生素，极性大，在碱液中易破坏，在酸液中稳定，褪黑激素与维生素B6化学结构不相关，理化性质和色谱行为差异大，因此实现同时分析的难度较大。本实验考察了甲醇-水、甲醇-20 mmol/L磷酸二氢铵(磷酸调至pH 3.0)、甲醇-50 mmol/L磷酸二氢铵、甲醇-0.04%戊烷磺酸钠(用冰醋酸调至pH 3.0)、乙腈-10 mmol/L磷酸二氢铵(含0.01%庚烷磺酸钠)、乙腈-10 mmol/L磷酸二氢铵(含0.01%庚烷磺酸钠，用磷酸调至pH 3.0)、乙腈-50 mmol/L磷酸二氢铵、乙腈-50 mmol/L磷酸二氢铵(磷酸调至pH 3.0)作为流动相对维生素B6和褪黑激素色谱峰的影响。发现维生素B6峰形受流动相影响较大，色谱峰容易出现前延或拖尾，本实验通过比较多种流动相发现，以乙腈-50 mmol/L磷酸二氢铵(磷酸调至pH 3.0)为流动相时两种目标成分峰形均很好 ......