1.5 克隆形成实验

    取对数生长期A549-control和A549-ING5-OE细胞，0.25%的胰酶消化计数后，10% FBS的DMEM配成单细胞悬液，以每孔300个/2 mL接种于6孔板中培养，3个复孔。细胞贴壁生长5 d后每孔加500 μL FBS继续培养并观察克隆形成情况，待肉眼观察菌落形成后(14 d左右)，弃上清，PBS清洗3次，加1 mL 4%多聚甲醛溶液室温固定15 min。弃固定液，PBS清洗3次，加0.1%结晶紫染液室温染色15 min。弃染液，PBS清洗3次，室温风干后计数超过50个细胞的克隆。

    1.6 乳酸脱氢酶(LDH)活性检测实验

    取对数生长期A549-control和A549-ING5-OE细胞，0.25%的胰酶消化、4℃预冷的PBS洗涤、离心后加适量裂解液混匀冰上裂解30 min ......