1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 试剂和仪器 试剂：甲基绿、蛋白酶抑制剂、OCT组织包埋剂、十二烷基磺酸钠(SDS)、二硫苏糖醇(DTT)、苯三氟乙酸(TFA)、胰蛋白酶、iTRAQ试剂(118，121)，SCX强阳离子交换柱(Luna SCX 100A)、strata-X C18除盐柱。

    仪器：Beckman L765超速离心机、徕卡CM1900冰冻切割机、激光捕获显微切割系统、CTR6000激光捕获显微切割仪、高效液相色谱仪(日本岛津公司)、microTOF-Q II质谱、UltrafleXtreme MALDI TOF/TOF基质辅助激光解析飞行时间质谱。

    1.1.2 标本采集及处理 12对结肠腺癌标本均来自中南大学湘雅医院普外科手术切除标本；其中男7例，女5例，患者平均年龄为(48±8)岁，临床分期按照DUKES分期分为A-D期。所有病例术前未接受放疗和化疗，并经病理学专家确诊。手术切除的新鲜结肠癌组织与配对结肠黏膜组织相距至少10 cm ......