2D3对人白血病6T—CEM细胞株凋亡及VDR蛋白表达的影响> 1,25(OH)2D3对人白(2)
2D3对人白血病6T—CEM细胞株凋亡及VDR蛋白表达的影响'> 1,25(OH)2D3对人白血病6T—CEM细胞株凋亡及VDR蛋白表达的影响
1 材料与方法1.1 细胞培养
人急性T淋巴细胞白血病细胞株6T-CEM由中国科学院上海生命科学研究所提供,置于-80℃冰箱中保存。培养方法如下:将菌株取出后于37℃迅速融化,以1000 r/min离心(离心半径为3 cm)5 min后弃上清液,利用培养液洗涤后加入含10%胎牛血清的DMEM培养液进行重悬,于37℃、5%CO2条件下培养,每2~3天换液并传代1次。
1.2 实验分组
将CEM细胞悬液密度调整为2.0×105/mL,接种于96孔培养板,每孔200 μL,采用随机数字表法将实验分为A、B、C、D四组,A、B、C组分别加入以DMSO稀释的浓度为10-6、10-7、10-8 mol/L的1,25(OH)2D3各100 μL,D组加入100 μL DMSO,每组设3个复孔。
1.3 MTT检测细胞增殖
取各组细胞悬液加入MTT(5 mg/mL)孵育4 h,随后加入DMSO进行溶解并沉淀,利用酶标仪在490 nm波长测定各孔的吸光值(A),每组实验重复3次。细胞增殖抑制率=(对照孔平均OD值-用药孔平均OD值)/对照孔平均OD值×100% ......
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